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實驗方法原理本實驗用1μg/ml三尖杉酯堿HT在體外誘導培養的HL-60細胞發生凋亡,同時也有少數細胞發生壞死。用Hoechst33342和碘化丙啶(propidiumiodide,PI)對細胞進行雙重染色,可以區別凋亡、壞死及正常細胞。三尖杉酯堿(HT)是我國自行研制的一種對急性粒細胞白血病,急性單核白血病等有良好療效的抗腫瘤藥物。研究表明HT在0.02~5μg/ml范圍內作用2小時,即可誘導HL-60細胞凋亡,并表現出典型的凋亡特征。細胞膜是一選擇性的生物膜,一般的生物染料如PI等不能穿過質
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實驗方法原理本實驗用1μg/ml三尖杉酯堿HT在體外誘導培養的HL-60細胞發生凋亡,同時也有少數細胞發生壞死。用Hoechst33342和碘化丙啶(propidiumiodide,PI)對細胞進行雙重染色,可以區別凋亡、壞死及正常細胞。三尖杉酯堿(HT)是我國自行研制的一種對急性粒細胞白血病,急性單核白血病等有良好療效的抗腫瘤藥物。研究表明HT在0.02~5μg/ml范圍內作用2小時,即可誘導HL-60細胞凋亡,并表現出典型的凋亡特征。細胞膜是一選擇性的生物膜,一般的生物染料如PI等不能穿過質
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2×探針法 qPCR Mix 2×Probe qPCR Mix
產品及特點本產品是基于熒光探針檢測的即用型PCR試劑盒,可以對靶片段進行實時定量PCR分析(quantitativePCR、qPCR)。產品含有經過優化的緩沖液組分、熱啟動TaqDNA聚合酶、TaqDNA穩定劑、dNTPs、MgCl2和穩定劑等所有實時定量PCR所需要的成分,用戶只需加入基因組DNA或cDNA模板、引物和探針即可進行探針法實時定量PCR反應,具有廣泛的用途。本產品具有下列特點:1.以2×Mix提供,用戶只需準備模板、引物、探針和ROX染料(取決于qPCR儀器)即可以進行探針法實時 -
細胞表面標記的檢測技術活細胞免疫熒光技術-流式細胞儀標本的制備
實驗方法原理活細胞表面保留有較完整的抗原或受體,先用特異性鼠源性單克隆抗體與細胞表面相應抗原結合,再用熒光標記的第二抗體結合,根據所測定的熒光強度和陽性百分率即可知相應抗原的密度和分布。實驗材料抗體血清試劑、試劑盒RPMI1640DPBS洗滌液固定液儀器、耗材玻璃管塑料管離心機顯微鏡實驗步驟1.制備活性高的細胞懸液(培養細胞系、外周血單個核細胞、胸腺細胞、脾細胞等均可用于本法)2.用10%FCSRPMI1640調整細胞濃度為5×106~1×107/ml3.取40μl細胞懸液加入預先有特異性McA -
實驗方法原理1.從動物或人組織中提取的細胞,在體外培養中,細胞會有不同程度的分裂增殖,稱為增殖性衰老。但是有些細胞在自發或其他條件誘導下可突破增殖性衰老,擁有無限增殖的能力,成為永生化細胞,骨髓來源的間充質干細胞屬于多能干細胞,可作為組織工程種子細胞的來源。2.端粒酶對染色體的穩定性及決定細胞生命周期起極其重要的作用。端粒酶或末端轉移酶是由兩個主要的亞單位構成:RNA成分(hTR)和蛋白質分解亞單位(hTERT),RNA(hTR)亞單位普遍表達于正常和腫瘤組織中,而蛋白質分解亞單位(hTERT)
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實驗方法原理細胞周期指細胞一個世代所經歷的時間。從一次細胞分裂結束到下一次分裂結束為一個周期。細胞周期反應了細胞增殖速度。單個細胞的周期測定可采用縮時攝影的方法,但它不能代表細胞群體的周期,故現多采用其他方法測群體周期。BrdU(5-溴脫氧尿嘧啶核苷)加入培養基后,可做為細胞DNA復制的原料,經過兩個細胞周期后,細胞中兩條單鏈均含BrdU的DNA將占l/2,反映在染色體上應表現為一條單體淺染。如經歷了三個周期,則染色體中約一半為兩條單體均淺染,另一半為一深一淺。細胞如果僅經歷了一個周期,則兩條單
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化學發光免疫分析(Chemiluminescenceanalysis,CLIA)誕生于1977年。根據放射免疫分析的基本原理,將高靈敏的化學發光技術與高特異性的免疫反應結合起來,建立了化學發光免疫分析法。CLIA具有靈敏度高、特異性強、線性范圍寬、操作簡便、不需要十分昂貴的儀器設備等特點。CLIA應用范圍較廣,既可檢測不同分子大小的抗原、半抗原和抗體,又可用于核酸探針的檢測。CLIA與放射免疫分析(RIA)、熒光免疫分析(IFA)及酶免疫分析(EIA)相比,具有無fushe、標記物有效期長并可實
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一、選擇熒光標記要匹配熒光直標抗體的一個主要優勢在于它為多重檢測提供了機會,比如現在一些先進的流式細胞儀能檢測每個細胞中20多個離散參數。在設計多重實驗時,應考慮每種熒光基團的*性質,如大吸收波長和大發射波長,消光系數和斯托克斯位移等因素。對于免疫熒光分析方法,人們要同時檢測組織或細胞樣本中的多個抗原,常常會利用直標一抗進行免疫熒光共染色,這時一般盡量選擇光譜重疊比較少的熒光基團進行組合。比如,我們會選擇一個AF488標記的抗體和另一個AF647標記的抗體進行兩個不同蛋白的共染色。對于流式細胞分

