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石蠟切片免疫組化實驗之即用型(Envision)快速酶免疫組化二步法
實驗方法原理根據聚合酶技術把辣根過氧化物酶抗鼠或/和抗兔IgG分子結合在多聚酶上形成多聚物分子,其與待檢的抗原特異性的結合后,加入底物顯色。實驗材料石蠟切試劑、試劑盒PBS檸檬酸鹽緩沖液蒸餾水增強劑酶標抗鼠兔聚合物蘇木素酒精二甲苯樹膠鹽酸二氨基聯苯胺儀器、耗材烘箱微波盒塑料切片架顯微鏡膠頭滴管實驗步驟1.石蠟切片置于67℃烘箱中,烘片2小時,脫蠟至水,用pH7.4的PBS沖洗三次,每次3分鐘(3×3’)。2.取一定量pH=6.0檸檬酸鹽緩沖液,加入微波盒中,微波加熱至沸騰,將脫蠟水化后的組織切片 -
實驗方法原理SP(streptavidin-perosidase)法,即鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連結法。SP法是常使用的方法。試劑、試劑盒二甲苯酒精PBS雙氧水枸櫞酸緩沖液羊血清工作液辣根過氧化物酶鏈霉素卵白素蘇木素DAB儀器、耗材冰箱顯微鏡燒杯玻璃缸實驗步驟1.烤片:68℃,20min。2.常規二甲苯脫蠟,梯度酒精脫水:二甲苯I20min?二甲苯II20min?00%酒精10min?100%酒精10min?95%酒精5min?80%酒精5min?70%酒精5min。3.阻斷滅活內源性過氧
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實驗方法原理本實驗用1μg/ml三尖杉酯堿HT在體外誘導培養的HL-60細胞發生凋亡,同時也有少數細胞發生壞死。用Hoechst33342和碘化丙啶(propidiumiodide,PI)對細胞進行雙重染色,可以區別凋亡、壞死及正常細胞。三尖杉酯堿(HT)是我國自行研制的一種對急性粒細胞白血病,急性單核白血病等有良好療效的抗腫瘤藥物。研究表明HT在0.02~5μg/ml范圍內作用2小時,即可誘導HL-60細胞凋亡,并表現出典型的凋亡特征。細胞膜是一選擇性的生物膜,一般的生物染料如PI等不能穿過質
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實驗方法原理根據凋亡細胞固有的形態特征,使用合適的顯微鏡檢測凋亡細胞形態變化。實驗材料Hela細胞Jurkat細胞試劑、試劑盒DAPIHoechst蒸餾水PBS儀器、耗材光學顯微鏡倒置顯微鏡透射電子顯微鏡熒光顯微鏡共聚焦激光掃描顯微鏡實驗步驟一、光學顯微鏡和倒置顯微鏡1.未染色細胞:凋亡細胞的體積變小、變形,細胞膜完整但出現發泡現象,細胞凋亡晚期可見凋亡小體。貼壁細胞出現皺縮、變圓、脫落。2.染色細胞:常用姬姆薩染色、瑞氏染色等。凋亡細胞的染色質濃縮、邊緣化,核膜裂解、染色質分割成塊狀和凋亡小體
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實驗方法原理細胞凋亡早期改變發生在細胞膜表面,目前早期識別仍有困難。這些細胞膜表面的改變之一是磷脂酰絲氨酸(PS)從細胞膜內轉移到細胞膜外,使PS暴露在細胞膜外表面。PS是一種帶負電荷的磷脂,正常主要存在于細胞膜的內面,在細胞發生凋亡時細胞膜上的這種磷脂分布的不對稱性被破壞而使PS暴露在細胞膜外。AnnexinV是一種Ca+依賴的磷脂結合蛋白,初發現是一種具有很強的抗凝血特性的血管蛋白,AnnexinV具有易于結合到磷脂類如PS的特性。對PS有高度的親和性。因此,該蛋白可充當一敏感的探針檢測暴露
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本試劑盒只能用于科學研究,不得用于醫學診斷植物細胞色素C氧化酶(COX)ELISA試劑盒使用說明書檢測原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被細胞色素C氧化酶(COX)抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的細胞色素C氧化酶(COX)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。樣品收集、處理及
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本試劑盒只能用于科學研究,不得用于醫學診斷植物(Plant)交替氧化酶(AOX)ELISA檢測試劑盒使用說明書檢測原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被交替氧化酶(AOX)抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的交替氧化酶(AOX)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品含量。樣品收集、處理及
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實驗材料孕鼠新生小鼠試劑、試劑盒RPMI1640培養基牛血清胰蛋白酶Hanks液酒精青霉素鏈霉素儀器、耗材培養瓶青霉素瓶廢液缸血球計數板蠟盤手術器械大頭針離心管小玻璃漏斗三角燒瓶平皿吸管試管移液管無菌紗布無菌眼科剪實驗步驟一、將孕鼠或新生小鼠拉頸椎致死,置75%酒精泡2-3秒鐘(時間不能過長、以免酒精從口和肛門浸入體內)再用碘酒消毒腹部,取胎鼠帶入超凈臺內(或將新生小鼠在超凈臺內)解剖取肝臟,置平皿中。二、用Hank's液洗滌三次,并剔除脂肪,結締組織,血液等雜物。三、用手術剪將肝臟剪成小塊(1

