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○樣本收集1、血液樣本的收集:全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。①不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。②抗凝收集血漿:收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及枸櫞酸鈉。生化實(shí)驗(yàn)一般建議用肝素抗凝。選
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一、勻漿介質(zhì)的制備:一般采用pH7.4,0.01mol/LTris-HCl,1mmol/LEDTA-2Na,0.01mol/L蔗糖,0.8%氯化鈉溶液或直接用0.86%的生理鹽水作為勻漿介質(zhì)。二、組織勻漿的制備1、取組織塊(0.1g~0.2g)最少可到2~5mg在冰冷的生理鹽水中漂洗,除去血液,濾紙拭干,準(zhǔn)確稱重,放入5ml的勻漿管中。2、按重量(g):體積(ml)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(zhì)(pH7.4,0.01mol/LTris-HCl,1mmol/LEDTA-2Na,0.01mol
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一、擴(kuò)增流程收到產(chǎn)品后,請(qǐng)先根據(jù)產(chǎn)品管壁標(biāo)簽來(lái)判斷產(chǎn)品形式,并在擴(kuò)增前準(zhǔn)確查找該質(zhì)粒菌株的抗性、感受態(tài)和培養(yǎng)溫度。1、質(zhì)粒干粉(常溫運(yùn)輸,存于-20度,90天保質(zhì)期,請(qǐng)務(wù)必先轉(zhuǎn)化提質(zhì)粒后使用)①收到質(zhì)粒干粉后請(qǐng)先5000rpm離心1min,再加入20μlddH2O去離子水溶解質(zhì)粒;②取1支100μl感受態(tài)于冰上解凍10min,加入2μl質(zhì)粒,再冰浴30min后,42℃熱激60s,不要攪動(dòng),再冰浴2min;(從第二步開(kāi)始均要在超凈工作臺(tái)中無(wú)菌操作)③加入900μl無(wú)抗的LB液體培養(yǎng)基,180rpm
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一、免疫組化操作步驟(一)、儀器設(shè)備1、18cm不銹鋼高壓鍋或電爐或用微波爐2、水浴鍋(二)、試劑1、PBS緩沖液(pH7.2―7.4)2、0.01mol/L檸檬酸鈉緩沖液(CB,pH6.0,1000ml)3、3%甲醇―H2O2溶液:用30%H2O2和80%甲醇溶液配制4、風(fēng)裱劑:a.甘油和0.5mmol/L碳酸鹽緩沖液(pH9.0–9.5)等量混合b.油和TBS(PBS)配制5、TBS/PBSpH9.0–9.5,適用于熒光纖維鏡標(biāo)本;pH7.0-7.4適合光學(xué)纖維標(biāo)本(三)、操作流程1、脫蠟和
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一、實(shí)驗(yàn)原理:堿裂解法提取質(zhì)粒是根據(jù)共價(jià)閉合環(huán)狀質(zhì)粒DNA與線性染色體DNA在拓?fù)鋵W(xué)上的差異來(lái)分離它們。在pH值介于12.0~12.5這個(gè)狹窄的范圍內(nèi),線性的DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)解開(kāi)而被變性,盡管在這樣的條件下,共價(jià)閉環(huán)質(zhì)粒DNA的氫鍵會(huì)被斷裂,但兩條互補(bǔ)鏈彼此相互盤繞,仍會(huì)緊密地結(jié)合在一起。當(dāng)加入pH4.8的乙酸鉀高鹽緩沖液恢復(fù)pH至中性時(shí),共價(jià)閉合環(huán)狀的質(zhì)粒DNA的兩條互補(bǔ)鏈仍保持在一起,因此復(fù)性迅速而準(zhǔn)確,而線性的染色體DNA的兩條互補(bǔ)鏈彼此已*分開(kāi),復(fù)性就不會(huì)那么迅速而準(zhǔn)確,它們纏繞形成網(wǎng)狀
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POCT檢測(cè)試劑中C線的質(zhì)控原料—雞IgY及羊抗雞IgY
背景介紹產(chǎn)生IgY的動(dòng)物基本是卵生的,存在于禽類血液中的主要免疫球蛋白(IgY)會(huì)傳遞給它們的后代,并在蛋黃中積累。IgY技術(shù)發(fā)展歷程(引自:IgY-technology(eggyolkantibodies)inhumanmedicine:Areviewofpatentsandclinicaltrials)禽類抗體主要集于卵黃中,卵黃中的抗體占禽類本身所有抗體的80%左右,血清中抗體約占19%。禽類體內(nèi)主要存在3種免疫球蛋白,即IgY、IgM和IgA,其中IgY是禽類的主要免疫球蛋白,IgY主要 -
本試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷人(Human)腸炎沙門氏菌IgG抗體(Salmonellaenteritidis-IgG)ELISA檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明書檢測(cè)原理試劑盒采用雙抗原一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被腸炎沙門氏菌抗原的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),與CUTOFF值相比較,從而判定標(biāo)本中人
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人系統(tǒng)性紅斑狼瘡IgG抗體(SLE-IgG) ELISA
本試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷人(Human)系統(tǒng)性紅斑狼瘡IgG抗體(SLE-IgG)ELISA檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明書檢測(cè)原理試劑盒采用雙抗原一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被系統(tǒng)性紅斑狼瘡抗原的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),與CUTOFF值相比較,從而判定標(biāo)本中人系統(tǒng)性紅斑狼瘡IgG抗體(SLE

