一、 樣品預處理（核心步驟，決定測試準確性）

1. 樣品純化

   采用沉淀 - 洗滌 - 干燥法：將聚合物溶于良溶劑（如 THF、二甲基甲酰胺 DMF），逐滴加入過量不良溶劑（如正己烷、甲醇）沉淀；過濾后用新鮮不良溶劑洗滌沉淀 2~3 次，去除小分子雜質；最后置于真空干燥箱，40~60℃干燥 12~24 h，除去殘留溶劑。

2. 制樣操作

• 濃度控制：稱取 10~15 mg 干燥樣品，溶于與流動相相同的溶劑中，配置成 1~2 mg/mL 的溶液。濃度過高易導致色譜柱過載、峰形拖尾；濃度過低則信號弱，無法準確積分。

• 溶解與分散：超聲振蕩 10~15 min，確保樣品溶解；若出現輕微渾濁，不可加熱（避免聚合物降解），可適當補加少量良溶劑。

• 過濾除雜：用0.45 μm 濾膜過濾溶液 —— 有機相體系用有機相濾膜（如聚四氟乙烯 PTFE 材質），水相體系用水系濾膜（如纖維素酯材質），防止不溶性顆粒堵塞色譜柱篩板。

二、 關鍵參數選擇：流動相體系與色譜條件

三、 標準曲線標定

1. 標樣選擇

• 有機相體系：選用聚苯乙烯（PS）標樣（分子量范圍 500~1000000），覆蓋待測聚合物的分子量區間。

• 水相體系：選用聚乙二醇（PEG）標樣，避免用 PS 標樣（極性差異大，標定結果嚴重失真）。

2. 標樣測試：將不同分子量的標樣配成 1 mg/mL 溶液，按相同色譜條件測試，以標樣分子量的對數（IgM） 對保留時間（t_R） 繪制標準曲線，擬合得到線性方程。

四、 樣品測試與數據處理

1. 色譜柱平衡：測試前用流動相沖洗色譜柱 30~60 min，直至檢測器基線平穩（基線波動＜0.1 mV），確保柱內填料充分溶脹。

2. 進樣測試：取 20~50 μL 過濾后的樣品溶液進樣，記錄色譜流出曲線（橫坐標保留時間，縱坐標檢測器響應值）。

3. 數據計算：通過 GPC 工作站軟件，將樣品的保留時間代入標準曲線，計算得到Mn（數均分子量）、Mw（重均分子量），進而得到 PDI = (Mw/Mn)。

• 注意：兩親聚合物若出現雙峰或寬峰，可能是分子聚集導致，需降低樣品濃度或優化流動相。

五、 常見問題及解決辦法

六、 通用注意事項

1. 測試過程中保持流速穩定，避免流速波動導致保留時間重現性差。

2. 不同批次樣品需在相同色譜條件下測試，確保數據具有可比性。

3. 色譜柱需定期維護：用純流動相沖洗保存，避免殘留樣品堵塞或污染填料。