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ThermoFisher賽默飛QubitFlex熒光計做實驗需要哪些試劑和耗材？

時間：2025/12/18閱讀：749

Qubit Flex是一款用于精確定量核酸（DNA、RNA）和蛋白質濃度的儀器，其核心原理是使用特定的熒光染料，這些染料只與目標分子結合并發出熒光。

一、核心檢測試劑（Assay Kits）

1、核酸定量試劑盒（常用）

（1）Qubit dsDNA HS Assay Kit：常用的試劑盒，用于高靈敏度定量雙鏈DNA。線性范圍廣（0.2 pg/μL 至 100 ng/μL），對dsDNA特異性高，不受RNA、單鏈DNA或游離核苷酸的干擾。適用于下一代測序（NGS）、克隆、PCR等對DNA濃度要求精確的應用。

（2）Qubit dsDNA BR Assay Kit：用于定量高濃度雙鏈DNA。線性范圍較寬（2 pg/μL 至 1,000 ng/μL），但靈敏度不如HS試劑盒。適用于濃度較高的DNA樣品，如質粒提取、基因組DNA等。

（3）Qubit RNA HS Assay Kit：用于高靈敏度定量RNA。能有效區分RNA和DNA，專門用于評估RNA樣品的純度和濃度，例如在轉錄組測序、qRT-PCR前使用。

（4）Qubit ssDNA Assake Kit：用于定量單鏈DNA，例如寡核苷酸、引物等。

（5）Qubit microRNA Assay Kit：專門用于定量微RNA（miRNA）等小RNA，靈敏度高。

2、蛋白定量試劑盒

（1）Qubit Protein Assay Kit：用于快速、準確的蛋白質濃度定量。相對于傳統的UV吸光度法（A280），它特異性更強，不受污染物（如游離氨基酸、去污劑等）的干擾。

（2）Qubit Protein BR Assay Kit：用于較高濃度范圍的蛋白質定量。

選擇建議：對于絕大多數分子生物學實驗，Qubit dsDNA HS Assay Kit 是您的必需品。

二、通用實驗耗材

這些是每次實驗都需要用到的消耗品。

1、Qubit 檢測管

這是最關鍵的耗材。Qubit Flex使用的是專屬的、特制的0.5 mL薄壁PCR管，其透明度和尺寸經過精確校準，以確保熒光讀數的準確性。

重要提示：必須使用賽默飛原廠或認證的Qubit檢測管。使用普通的、未經認證的PCR管會導致結果嚴重不準，因為普通管子的透光性和熒光背景不同。試劑盒通常會附帶一定數量的檢測管。

2、無酶水

用于稀釋試劑盒中的工作液和您的樣品。必須使用高純度的無核酸酶、無蛋白酶的水（如DNase/RNase-Free Water），以避免污染和背景干擾。

3、移液器及配套吸頭

需要精確的移液器（如0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL）和無核酸酶、無熱原的濾芯吸頭，以確保加樣的準確性和避免交叉污染。

4、微型離心機

用于在測量前瞬時離心檢測管，將管壁和管蓋上的液體離心至管底，避免氣泡干擾，確保液體體積準確。

5、渦旋混合器

用于充分混勻試劑和工作液。

6、計時器

Qubit試劑有明確的孵育時間要求（通常為2-3分鐘），需要一個計時器來確保所有樣品孵育時間一致。

三、總結清單

1、核心試劑

必需品：Qubit [檢測項目] Assay Kit

說明：根據樣品選擇，如dsDNA HS, RNA HS, Protein等

2、關鍵耗材

必需品：Qubit檢測管 (0.5 mL)

說明：必須使用認證過的專用管

3、通用耗材

必需品：無酶水 (DNase/RNase-Free)

說明：用于稀釋

必需品：精確移液器和濾芯吸頭

說明：確保加樣準確，避免污染

必需品：微型離心機、渦旋混合器、計時器

說明：標準實驗室設

在使用前，請務必閱讀您所購買試劑盒的詳細說明書，并訪問賽默飛獲取Qubit Flex的用戶手冊和新信息。正確的耗材和規范的操作是獲得可靠數據的基礎。

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