艾本德（Eppendorf）電動移液器的校準是一項需要嚴格按照規(guī)范操作的精密工作。建議由經(jīng)過培訓的專業(yè)人員或在廠家工程師指導下進行。在校準前，請務必詳細閱讀您移液器型號的用戶手冊，因為不同型號（如 Eppendorf Xplorer / Research plus 電動型、Eppendorf E3/E4 等）的操作細節(jié)可能略有不同。

以下提供一套適用于大多數(shù)艾本德電動移液器的通用校準步驟流程，它基于標準的質量測定法（也稱“稱重法"）。

一、艾本德電動移液器校準原則與準備

1、校準環(huán)境：在無風、穩(wěn)定的臺面進行，環(huán)境溫度穩(wěn)定在20-25°C為佳（溫度波動<0.5°C/h），相對濕度50%以上（防止蒸發(fā)過快）。

2、設備與試劑：

（1）待校準的艾本德電動移液器

（2）經(jīng)過計量認證的分析天平（精度至少為移液器最小分度值對應質量的0.1%，如校準10μl量程，需精度達0.001g的百萬分之一天平）

（3）經(jīng)認證的溫度計和濕度計

（4）校準用純水：高純度去離子水（電阻率≥10 MΩ·cm），提前與水、移液器、吸頭、天平在同一環(huán)境下平衡至少2小時。

（5）匹配的、高質量的吸頭：推薦使用Eppendorf原裝吸頭。

（6）稱量容器（如小燒杯）。

3、安全：遵守實驗室安全規(guī)范。

二、艾本德電動移液器標準校準流程

整個流程可概括為：測試當前性能 → 判斷是否合格 → 如不合格則進行內部校準（Adjustment） → 再次驗證。

A、性能測試

1、設置目標體積：在移液器上設置需要校準的體積點。通常至少選擇三個點：量程上限（100%）、中間點（約50%）和量程下限（10%或最小量程）。例如，對于100-1000μl的移液器，可選擇1000μl、500μl和100μl。

2、準備天平與記錄表：打開天平，調零。準備好記錄表，記錄環(huán)境溫度、濕度、水的密度等。

3、預潤濕：裝上吸頭，吸取并排空校準用水3-5次，使吸頭內壁形成穩(wěn)定的液膜，減少誤差。

4、重操作：

（1）將稱量容器放在天平上，去皮歸零。

（2）使用移液器小心吸取目標體積的純水。

（3）以推薦的移液模式（通常為“常規(guī)模式"）將水排入稱量容器。

（4）注意排液技巧：對于大部分移液器，應將吸頭頂部靠在容器內壁，緩慢、穩(wěn)定地按下排液鍵到底，停留一秒后，沿壁滑出。

（5）記錄天平顯示的穩(wěn)定讀數(shù)（質量m，單位g）。

5、重復測量：對每個體積點重復測量10次。每次更換新吸頭，并重復預潤濕步驟。

6、與標準比較：

將計算出的系統(tǒng)誤差和隨機誤差，與移液器商家聲明的允許誤差限進行比較。艾本德的允許誤差通常遵循ISO 8655或自定更嚴格的標準。

B、判斷與決策

1、如果兩項誤差均在允許范圍內 → 移液器性能合格，無需調整，出具校準報告即可。

2、如果任一項誤差超出允許范圍 → 移液器需要內部校準（即調整其內部參數(shù)）。

C、內部校準

這是制造商對“校準"的專業(yè)定義，用戶通常稱之為“校正"或“調校"。必須在性能測試不合格后進行。

通用流程如下：

1、進入校準模式：

通常需要關機，然后按住特定按鍵（如“排液鍵"或“ eject鍵"）的同時開機，或通過菜單（Settings -> Service -> Calibration）進入。請務必查閱手冊！

2、選擇校準體積點：系統(tǒng)通常會提示你校準幾個關鍵點（如大、小體積）。

3、執(zhí)行校準：

（1）系統(tǒng)會提示你“吸取"一個參考值（可能是空氣，或要求你連接一個校準工具模擬負載）。

（2）對于需要真實體積校準的型號，你需要使用一把已校準好的、精度更高的參考移液器，或者按照屏幕提示，使用剛才稱重法測得的實際平均值作為輸入。

（3）根據(jù)移液器提示，輸入目標值（即你希望移液器達到的精確體積）。

（4）移液器內部電機會自動調整其活塞行程的步進數(shù)，從而改變吸取體積。

4、保存并退出：完成所有點的調整后，保存新參數(shù)，退出校準模式。

D、校準后驗證

完成內部校準后，必須重新執(zhí)行一步“性能測試"的全部流程，以驗證調整后的移液器誤差是否已回到允許范圍內。

E、文件化

記錄所有數(shù)據(jù)、環(huán)境條件、操作人員、日期，并貼上清晰的校準狀態(tài)標簽（注明下次校準日期）。

三、重要建議

1、專業(yè)服務：對于實驗室質量控制（GLP/GMP）或關鍵應用，建議將移液器送至艾本德的計量服務中心或具備資質的第三方機構進行校準。他們有更專業(yè)的設備、環(huán)境和認證流程。

2、定期進行：根據(jù)使用頻率，通常每6-12個月應進行一次校準。日常使用中應每月進行快速的功能檢查。

3、軟件輔助：使用艾本德的移液器校準/管理軟件（如“Eppendorf Pipette Calibration"），可以極大簡化Z值計算、數(shù)據(jù)記錄和報告生成。