一、試劑基本信息
英文名稱：Janelia Fluor 549, SE ；JF549, SE；JF549, NHS；Janelia Fluor 549, succinimidyl ester；JF549, succinimidyl ester
中文名稱：JF549琥珀酰亞胺酯；JF549活性酯
CAS：1811539-32-8
二、化學結構與反應特性
Janelia Fluor 549, SE 的核心結構基于硅羅丹明（silicon-rhodamine）骨架，通過引入特定取代基優化其光物理性質。其琥珀酰亞胺酯（SE）官能團可與伯胺（如蛋白質中的賴氨酸殘基或N端氨基）發生親核取代反應，形成穩定的酰胺鍵。該反應通常在pH 7–9的緩沖體系中進行，適用于水相或含少量有機溶劑的混合體系。
SE形式的染料具有較高的反應活性，但對水敏感，需在干燥條件下儲存，并在使用前避免長時間暴露于潮濕環境中。反應完成后，未反應的染料可通過透析、凝膠過濾或沉淀等方法去除。
三、結構式：
四、試劑詳細信息
分子式：C31H25N3O7
分子量：551.55
Emission (Em)：549
Excitation (Ex)：505
試劑性狀：棕色到黑色固體
規格：1mg、5mg、10mg（可按需包裝）
純度：95％+
溶解性：溶于部分有機溶液，溶于水。
供應商：西安凱新生物科技
儲存條件：不超-20℃干燥、避光儲存；不可反復凍融，現配現用！
注意事項：該試劑僅用于科研，不可用于診療。
五、應用場景與實驗注意事項
Janelia Fluor 549, SE 主要用于體外標記純化的蛋白質、抗體、多肽或寡核苷酸等生物分子。標記后的產物可用于：
熒光顯微鏡（包括共聚焦、TIRF、超分辨成像）
流式細胞術
單分子追蹤
熒光相關光譜（FCS）
實驗過程中需注意以下幾點：
1.染料與目標分子的摩爾比：過高比例可能導致非特異性標記或多聚化；建議初始比例為3:1至10:1（染料:蛋白），根據具體體系優化。
2.緩沖液成分：避免使用含伯胺的緩沖液（如Tris），因其會競爭性消耗染料。推薦使用碳酸氫鈉、磷酸鹽或HEPES緩沖體系。
3.反應時間與溫度：室溫下反應30–60分鐘通常足夠；延長反應時間或提高溫度可能增加副反應風險。
4.產物純化與保存：標記后應盡快去除游離染料，并將產物分裝凍存于–80°C，避免反復凍融。
六、相關試劑
Janelia Fluor 525, SE
Janelia Fluor 585, SE
Janelia Fluor 646, SE
Alexa Fluor 555, NHS Ester
TAMRA, SE
Cy3, NHS Ester
ATTO 550, NHS Ester
DyLight 550, NHS Ester
CF 568, SE
Silicon Rhodamine (SiR), NHS Ester
Janelia Fluor 549, maleimide
Janelia Fluor 549, azide
Janelia Fluor 549, alkyne
Janelia Fluor 549, carboxylic acid
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供應商：西安凱新生物科技有限公司
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西安凱新生物科技有限公司是國內的點擊化學試劑供應商，產品應用于各大科研院校、檢驗機構、環境監測、生物制藥、石油化工、航天技術、公共安全等眾多領域。
我公司提供的點擊類化學試劑包括：DBCO、TCO、Tetrazine、Azide、Alkyne、Auxiliary reagents等。其中DBCO Reagents又包含了與氨基反應的，與羧基反應的，與生物素交聯的，與熒光素交聯的，與PEG交聯的等等產品。各試劑具有多樣的規格的包裝，能滿足您各類實驗需求，西安凱新所有員工希望能與您攜手共進，共創輝煌。
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