AIE-Gelgreen 核酸染料屬于聚集誘導發光（AIE）類熒光染料，其分子核心由四苯乙烯（TPE）骨架構成，通過柔性連接臂與帶正電荷的季銨鹽基團相連。TPE骨架作為AIE活性單元，在自由旋轉狀態下熒光微弱，但當分子因與核酸結合或在水相中聚集而限制分子內旋轉（RIR）時，熒光強度顯著增強。季銨鹽基團則賦予分子與DNA雙螺旋小溝或RNA單鏈區域靜電結合的能力，確保染料在核酸存在下實現高選擇性點亮。

該染料的激發峰位于約490 nm，發射峰位于約530 nm，與常見的SYBR Green I光譜高度重疊，兼容大多數標準凝膠成像系統及熒光定量PCR儀器。分子設計上引入了甲基與苯環的位阻效應，有效降低了背景熒光干擾，在未結合核酸狀態下溶液的熒光量子產率低于0.01，結合后提升至0.6以上，信噪比優勢明顯。

主要應用領域

1. 瓊脂糖凝膠電泳中的核酸染色

AIE-Gelgreen 可直接加入熔融瓊脂糖中（終濃度為1×）或電泳后浸泡染色。推薦染色條件：室溫避光浸泡20-30分鐘，再用去離子水漂洗5分鐘去除多余染料。使用302 nm或365 nm紫外燈激發可觀察到清晰條帶，靈敏度可達0.5 ng DNA/條帶，低于傳統EB染料的檢測下限。

2. 聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE）染色

針對小片段DNA或RNA分析，將染料以1×濃度溶于電泳緩沖液（如1×TBE），在電泳結束后對凝膠進行浸泡染色，時間延長至40分鐘，可有效染色小至20 bp的核酸片段，背景均勻性優于SYBR系列。

3. 熒光定量PCR（qPCR）中的實時監測

該染料可作為qPCR反應中的DNA結合染料使用，在延伸階段熒光信號隨擴增產物累積而線性增強。反應體系中建議終濃度為0.5×至1×，需注意優化引物濃度及退火溫度，避免因染料濃度過高導致PCR抑制現象。

操作規范與儲存條件

儲存規范

對出廠原液（通常為10000× DMSO溶液）進行分裝，每管50 μL或100 μL，密封后置于-20℃冰箱避光保存AIE-Gelgreen 核酸染料，避免反復凍融。若需長期儲存（超過3個月），建議轉移至-80℃環境。DMSO溶液在常溫下可穩定存放24小時，但不建議室溫暴露超過2小時。

工作液配制

用DMSO或滅菌去離子水將原液稀釋至工作濃度（通常為100×或10×），稀釋后工作液需在4℃避光條件下于2周內用完。注意：溶解時需充分渦旋振蕩，確保無結晶析出。若出現沉淀，可短暫加熱至37℃并超聲輔助溶解。

電泳染色操作

預染法：將染料按1:10000比例直接加入熔融瓊脂糖中（溫度降至50-60℃），混勻后制膠。注意高溫會破壞染料結構，切勿在瓊脂糖沸騰時加入。

后染法：電泳結束后將凝膠浸泡于含1×染料的1×TBE緩沖液中，室溫輕搖20分鐘，隨后用去離子水脫色10分鐘。后染法可降低因染料遷移對條帶分辨率的影響。

有關試劑

AIE-Gelgreen 核酸染料（標準型，用于DNA/RNA檢測）

AIE-Gelgreen Plus 核酸染料（增強型，靈敏度提升至0.25 ng/條帶）

SYBR Green I 核酸染料（經典替代品，需避光操作）

SYBR Safe 核酸染料（低毒替代品，適用于教學實驗）

GelRed 核酸染料（高靈敏度，安全性優于EB）

EB（溴化乙錠，傳統染色劑，具致突變性，需規范處理廢棄液）

注：該試劑僅用于科學研究，不能用于人體實驗或其他治療型用途。

本文試劑資料由西安凱新生物科技小華編輯整理。

供應商：西安凱新生物科技有限公司

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AIE-Gelgreen Nucleic Acid Dye核酸染料技術說明書

試劑詳情

分子構成與結構特點

主要應用領域

1. 瓊脂糖凝膠電泳中的核酸染色

2. 聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE）染色

3. 熒光定量PCR（qPCR）中的實時監測

操作規范與儲存條件

儲存規范

工作液配制

電泳染色操作

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1. 瓊脂糖凝膠電泳中的核酸染色

2. 聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE）染色

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