CAS:N/A(專有染料化合物,非單一CAS編號)
分子式:C??H??ClNO?(代表型結構,因批次微調)
溶解性:溶于DMSO、DMF、無水乙醇等有機溶劑;微溶于水,需配制母液后稀釋使用。
規格:50 µg,100 µg,1 mg(可按需包裝)
儲存條件:干燥、避光,溫度不超-20℃,建議分裝保存。
注意事項:現配現用,不可反復凍融;操作全程避光,避免熒光淬滅。
Golgi-Tracker Green 是一種基于BODIPY熒光骨架的小分子探針,分子結構中引入長鏈烷基取代的神經酰胺(C5-Ceramide)類似物作為高爾基體靶向基團。神經酰胺類脂分子能夠被細胞攝取后經鞘磷脂代謝途徑特異性富集于高爾基體膜結構上,BODIPY氟硼二吡咯發色團賦予其明亮的綠色熒光發射(激發/發射峰值約505/511 nm)。該探針的脂溶性鏈段長度與極性基團分布經過精確優化,可確保探針嵌入高爾基體膜層后穩定滯留,不易向內質網或溶酶體擴散。相較于傳統高爾基體染料(如C6-NBD-Ceramide),Golgi-Tracker Green 具有更高的光穩定性與更低的細胞毒性,在長時間活細胞動態成像中表現出色。探針的分子設計同時兼顧了膜穿透能力與靶向選擇性:其非極性尾部促進跨膜轉運,極性頭部通過脂質結合蛋白介導的識別作用實現高爾基體定位。
探針在37℃孵育后30分鐘內即可完成高爾基體富集,適用于激光共聚焦顯微鏡下對高爾基體形態變化、分裂、融合等過程進行實時追蹤,尤其適用于研究細胞周期中高爾基體碎片化與重組現象。
可用于評估布雷菲德菌素A(BFA)、諾考達唑等藥物對高爾基體結構的破壞效應,通過熒光信號強度的改變或分布模式異常判斷藥物作用機制。推薦使用濃度區間為1~5 µM(母液先以DMSO配制,再以無血清培養液稀釋),染毒后觀察時間窗口為30~120分鐘。
探針可與紅色或遠紅熒光蛋白標記的內質網、溶酶體、線粒體探針聯用,進行多通道共定位分析。因Golgi-Tracker Green 的發射光譜較窄(半峰寬約35 nm),與mCherry、Cy5等紅色通道無顯著串色,適合定量共定位系數計算。
將試劑恢復至室溫(約25℃)后,以無水DMSO或DMF溶解,配制1 mM母液高爾基體綠色熒光探針 Golgi-Tracker Green,分裝至棕色EP管中(每管10~20 µL),-20℃避光密封保存,有效期不超過6個月。
使用前以無血清培養液或HBSS緩沖液稀釋母液至1~5 µM工作濃度,不可使用含血清培養液,因血清蛋白會吸附探針降低染色效率。培養細胞需提前接種至玻底培養皿或共聚焦專用皿中,待細胞貼壁密度達50%~70%時,棄去舊培養液,加入預溫至37℃的工作液,置于培養箱中避光孵育30分鐘。孵育結束后以PBS洗滌細胞3次,每次5分鐘,隨后加入新鮮無酚紅培養液或成像緩沖液進行觀察。
激發光源選用488 nm激光線,發射收集范圍設置為500~550 nm。使用油鏡(63×或100×)成像時,激光功率控制在1%~5%,避免過度曝光導致光漂白及細胞損傷。如需長時間成像(>30分鐘),建議添加抗氧化試劑(如0.1%維生素C)以減緩熒光衰減。
探針工作液需現配現用,配制后1小時內使用;染色全程避光操作;若觀察到核周彌散熒光信號,提示探針濃度過高或孵育時間過長,需降低濃度至0.5~1 µM重新優化。
2. ER-Tracker Red(內質網紅色熒光探針)
3. LysoTracker Deep Red(溶酶體深紅熒光探針)
4. MitoTracker Orange CMTMRos(線粒體橙色熒光探針)
5. Brefeldin A(布雷菲德菌素A,高爾基體斷裂誘導劑)
6. C6-NBD-Ceramide(經典高爾基體熒光探針,綠色通道)
注:該試劑僅用于科學研究,不能用于人體實驗或其他治療型用途。
供應商:西安凱新生物科技有限公司
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