在法醫(yī)毒理學(xué)的尿液濫用藥物篩查場(chǎng)景中，尿液樣本中的目標(biāo)物大多以游離態(tài)或葡萄糖醛酸結(jié)合態(tài)存在，涵蓋了苯二氮卓類、代謝物等20余種不同極性的化合物，靳瀾HLB小柱憑借親水親脂均衡的吸附特性，可通過(guò)一套通用流程完成所有目標(biāo)物的高效提取，無(wú)需針對(duì)不同性質(zhì)藥物開(kāi)發(fā)多套萃取方案。

1. 樣本前處理準(zhǔn)備

取5mL混勻后的尿液樣本置于離心管中，根據(jù)目標(biāo)物特性選擇對(duì)應(yīng)的水解方式：針對(duì)常規(guī)濫用藥物，優(yōu)先選擇酸水解法，向樣本中加入200μL 1mol/L乙酸溶液，混勻后用稀鹽酸或稀氫氧化鉀溶液調(diào)節(jié)pH值至5.0左右，置于80℃水浴中加熱15分鐘，充分釋放葡萄糖醛酸結(jié)合態(tài)的代謝物；針對(duì)部分苯二氮卓類等不穩(wěn)定化合物，改用β-葡萄糖醛酸酶進(jìn)行酶水解，37℃水浴孵育2小時(shí)，避免目標(biāo)物在高溫強(qiáng)酸環(huán)境下發(fā)生降解；針對(duì)目標(biāo)物，則采用堿水解法進(jìn)行前處理。水解完成后將樣本冷卻至室溫，以3000r/min轉(zhuǎn)速離心10分鐘，取上清液待上樣。

2. 靳瀾HLB小柱活化平衡

選用靳瀾HLB 3cc/60mg規(guī)格固相萃取小柱，依次加入3mL甲醇、3mL去離子水完成活化平衡。不同于傳統(tǒng)硅膠基質(zhì)萃取柱，靳瀾HLB小柱的聚合物填料擁有優(yōu)異的水潤(rùn)濕性，即使活化過(guò)程中柱床不慎干涸，也不會(huì)對(duì)后續(xù)目標(biāo)物的回收率造成明顯影響，大幅降低了法醫(yī)檢測(cè)中珍貴樣本因操作失誤報(bào)廢的風(fēng)險(xiǎn)。

3. 上樣與淋洗凈化

將預(yù)處理完成的尿液上清液全部加載到活化后的HLB小柱上，控制上樣流速為1~2mL/min，依靠小柱表面的疏水相互作用、氫鍵和π-π作用，同時(shí)對(duì)酸性、堿性、中性的各類濫用藥物實(shí)現(xiàn)均衡保留。上樣完成后，依次加入3mL 5%甲醇水溶液進(jìn)行淋洗，去除樣本中殘留的極性鹽類、尿素等水溶性雜質(zhì)，淋洗完成后開(kāi)啟真空裝置將小柱抽干5分鐘，除去柱床內(nèi)殘留的水分，避免后續(xù)洗脫過(guò)程中出現(xiàn)乳化、回收率偏低的問(wèn)題。

4. 目標(biāo)物洗脫與后續(xù)檢測(cè)

向抽干后的小柱中加入2mL甲醇進(jìn)行洗脫，收集全部洗脫液置于35℃氮吹儀下緩慢吹干，最后用100μL乙腈-20mmol/L乙酸銨緩沖溶液（體積比70:30）復(fù)溶，渦旋混勻后過(guò)0.22μm有機(jī)相濾膜，即可直接送入液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀進(jìn)行MRM模式檢測(cè)。

該方法經(jīng)過(guò)大量實(shí)際樣本驗(yàn)證，尿液中23種常見(jiàn)濫用藥物及其代謝物的總體平均回收率可達(dá)86%±6.6%，其中21種目標(biāo)物的回收率高于75%，遠(yuǎn)優(yōu)于傳統(tǒng)液液萃取、SLE液液支撐萃取的效果，無(wú)需針對(duì)酸性、堿性、中性不同性質(zhì)的藥物開(kāi)發(fā)多套萃取方案，一套通用流程即可完成全部目標(biāo)物的高效提取，大幅提升了法醫(yī)毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)室的毒物篩查工作效率。