在細胞培養(yǎng)與細胞治療，尤其是MSC等干細胞培養(yǎng)領(lǐng)域，血清替代方案的升級正在加速。傳統(tǒng)胎牛血清（FBS）因動物源屬性帶來的免疫原性風(fēng)險、批次差異與合規(guī)障礙日益凸顯，人AB血清則受法規(guī)監(jiān)管，進口特殊物品審批風(fēng)險評估限制流程久價格貴。人血小板裂解液（Human Platelet Lysate，HPL血替） 作為新一代無動物源細胞培養(yǎng)補充劑，憑借高濃度生長因子、人源化安全屬性與與穩(wěn)定的批次一致性，正成為科研與工業(yè)級細胞培養(yǎng)血清替代物的更優(yōu)選擇。

01    IPHASE Human Platelet Lysate

IPHASE /匯智和源全新推出的科研級人血小板裂解液（Human Platelet Lysate）產(chǎn)品，是直接從健康人外周血或單采血血小板中提取、分離的血小板裂解液。作為FBS及人AB血清的替代物，無動物源成分，為間充質(zhì)干細胞、免疫細胞等多種人源細胞培養(yǎng)提供高效、安全、可重復(fù)的營養(yǎng)支持。

IPHASE  Human Platelet Lysate

規(guī)格：25mL，50mL，100mL，500mL

存儲：≤-20℃

運輸：干冰運輸

供體：全人源，嚴格篩選供者，批次間穩(wěn)定性好，無異源蛋白

檢測：低內(nèi)毒素（≤1.0 EU/mL），不含動物源，安全性高

資質(zhì)：ISO 9001 認證

02    血小板裂解液

（一）人血小板裂解液（HPL）

人血小板裂解液（Human Platelet Lysate）是一種以健康人血小板為原料，通過物理裂解方式釋放血小板內(nèi) α 顆粒活性物質(zhì)而制成的血清替代物（Serum Replacement）。血小板是人體內(nèi)天然的 "生長因子倉庫"，其 α 顆粒中富集了血小板衍生生長因子（PDGF-AA/BB）、轉(zhuǎn)化生長因子 -β（TGF-β）、血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）、表皮生長因子（EGF）、胰島素樣生長因子（IGF-1）、堿性成纖維細胞生長因子（bFGF）等數(shù)十種促增殖、促遷移的活性蛋白。

（二）制備工藝流程 

原料采集：取自正規(guī)渠道來源的全血，進一步分離得到血小板，嚴格篩查經(jīng)血傳播病原體

裂解處理：采用反復(fù)凍融法破碎血小板細胞膜，釋放 α 顆粒內(nèi)容物

澄清過濾：高速離心去除細胞碎片與膜成分，保留可溶性活性蛋白

除菌分裝：經(jīng) 0.22μm 無菌過濾，部分規(guī)格輔以去纖維蛋白原工藝處理

質(zhì)量放行：完成生長因子含量、內(nèi)毒素、無菌、支原體等全項檢測

（三）含肝素 vs 不含肝素 

HPL 產(chǎn)品分為含肝素型與無肝素型（去纖維蛋白原型）兩類，核心差異在于纖維蛋白原的去除程度：

含肝素型 HPL：保留血漿中天然纖維蛋白原，使用時需在培養(yǎng)基中添加終濃度約 2 U/mL 的肝素鈉，通過抗凝作用防止培養(yǎng)基中 Ca2?觸發(fā)纖維蛋白原凝固形成凝膠。優(yōu)勢是制備工藝簡單、生長因子保留更完整；劣勢是使用步驟增加，肝素可能對部分細胞實驗產(chǎn)生干擾。

無肝素型 HPL：通過氯化鈣沉淀或冷沉淀工藝預(yù)先去除纖維蛋白原，使用時無需額外添加肝素，培養(yǎng)基不會發(fā)生凝膠化。優(yōu)勢是操作簡便、無肝素干擾，更適合藥物篩選、凝血相關(guān)研究等場景；劣勢是工藝復(fù)雜度略高。

（四）HPL vs 胎牛血清 vs 人 AB 血清

大量研究證實，在間充質(zhì)干細胞（MSC）培養(yǎng)體系中，5% 濃度的 HPL 即可達到甚至超過 10% FBS 的促增殖效果，且細胞形態(tài)、表面標志物與分化潛能均無顯著差異。在 CAR-T 等免疫細胞培養(yǎng)中，HPL 與 AB 血清的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率相當(dāng)，同時具備更優(yōu)的批次穩(wěn)定性。

人間充質(zhì)干細胞增殖曲線（從P1擴增至P4）

03    IPHASE 科研級HPL產(chǎn)品特點與參數(shù)

IPHASE 匯智和源本次推出的HPL為科研級（RUO）產(chǎn)品，從原料到成品建立了全流程質(zhì)控體系。

（一）產(chǎn)品特點

1.純正人源，無動物源

原料全部取自正規(guī)渠道來源的全血，并進一步分離得到的血小板濃縮液，生產(chǎn)全程不使用任何動物源成分，是真正意義上的無動物源細胞培養(yǎng)補充劑（Xeno-free Cell Culture Supplement），從根源上消除異種蛋白污染風(fēng)險。

2.多供體混合，批次穩(wěn)定

采用多份供體血小板混合工藝，大幅降低個體差異帶來的性能波動。每批次產(chǎn)品均提供完整的質(zhì)量檢測報告（COA），確保實驗結(jié)果的可重復(fù)性。

3.高活性生長因子譜

優(yōu)化的凍融裂解工藝最-大程度保留血小板 α 顆粒中的天然生長因子組合，PDGF、TGF-β、VEGF、EGF 等關(guān)鍵因子含量充足，對多種原代細胞與干細胞具有優(yōu)異的促增殖活性。

4.雙規(guī)格可選，適配不同場景

標準型（含肝素配方）：性價比高，適配常規(guī)細胞培養(yǎng)，使用時添加肝素鈉即可去纖維蛋白原型（無肝素）：操作便捷，無需額外添加肝素，適配對肝素敏感的實驗體系

（二）技術(shù)參數(shù)

（三）IPHASE HPL使用流程

1. 產(chǎn)品解凍

• 從 - 20℃冰箱取出，置于 4℃冰箱過夜緩慢解凍或37℃水浴快速解凍（約 1 小時）具體時長依產(chǎn)品規(guī)格而定，至完-全融化即可。

• 完-全融化后輕輕顛倒混勻，避免劇烈震蕩產(chǎn)生泡沫

• 解凍后可能出現(xiàn)少量白色絮狀沉淀，屬纖維蛋白正常析出，不影響使用效果；若需澄清可 3500 g 離心 10 分鐘取上清，或配成完-全培養(yǎng)基后 0.22 μm 過濾

2. 完-全培養(yǎng)基配制（以標準型為例）

• 準備基礎(chǔ)培養(yǎng)基（如 α-MEM、DMEM/F12、RPMI 1640 等，根據(jù)細胞類型選擇），優(yōu)選IPHASE無血清培養(yǎng)基，IPHASE無血清經(jīng)過糖、脂質(zhì)復(fù)合物以及重組蛋白優(yōu)化，比基礎(chǔ)培養(yǎng)基具備更優(yōu)的擴增效果。

• 按5% 體積比加入HPL，即每 100 mL 基礎(chǔ)培養(yǎng)基加入 5 mL HPL

• 加入肝素鈉至終濃度2 U/mL（去纖維蛋白原型無需此步驟）

• 按需添加谷氨酰胺、雙抗等常規(guī)添加劑

• 充分混勻后即可使用，配制好的完-全培養(yǎng)基 建議4℃保存2周內(nèi)使用完畢，最長不超過4周，使用及存儲時避免污染。

3. 細胞培養(yǎng)操作建議

• 細胞接種密度：間充質(zhì)干細胞推薦接種密度為 6×103–8×103 個 /cm2，免疫細胞按對應(yīng)體系常規(guī)接種

• 體系轉(zhuǎn)換：從 FBS 體系轉(zhuǎn)換至 HPL 體系時，建議采用梯度適應(yīng)法（如 75% FBS+25% HPL→50% FBS+50% HPL→100% HPL），使細胞平穩(wěn)過渡

• 濃度優(yōu)化：不同細胞系對 HPL 敏感性存在差異，初次使用建議設(shè)置 2%、5%、8%、10% 濃度梯度，確定最佳工作濃度

• 傳代與換液：按常規(guī)細胞培養(yǎng)操作執(zhí)行，換液周期與 FBS 體系基本一致

4. 儲存與注意事項

• 產(chǎn)品收到后應(yīng)立即置于 - 20℃保存，長期儲存建議 - 80℃

• 避免反復(fù)凍融，建議分裝為單次使用量后凍存

• 全程嚴格無菌操作，產(chǎn)品僅用于科研實驗，不可用于臨床診斷或治療

（四）應(yīng)用領(lǐng)域

HPL作為高效的血清替代物（Serum Replacement），可廣泛應(yīng)用于各類人源細胞的體外培養(yǎng)與擴增，核心應(yīng)用場景包括：

1. 間充質(zhì)干細胞（MSC）培養(yǎng)與擴增

適用于骨髓、脂肪、臍帶、胎盤等多種組織來源的 MSC 培養(yǎng)，顯著促進細胞增殖并維持干性與多向分化潛能（成骨、成脂、成軟骨），是目前 MSC 規(guī)模化擴增的主流替代方案。

IPHASE 5%血小板裂解物搭配無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)MSC的圖片

2. 免疫細胞培養(yǎng)

支持 T 細胞、NK 細胞、CAR-T/CAR-NK 細胞的體外活化與擴增，轉(zhuǎn)染 / 轉(zhuǎn)導(dǎo)效率與 AB 血清相當(dāng)，同時批次穩(wěn)定性更優(yōu)，助力免疫細胞治療工藝開發(fā)。

IPHASE 5%血小板裂解物搭配無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)NK細胞的圖片

3. 內(nèi)皮細胞與血管類研究

HPL 中高含量的 VEGF、bFGF 等因子對內(nèi)皮細胞（HUVEC 等）具有優(yōu)異的促增殖與促管腔形成作用，廣泛應(yīng)用于血管生成、類器官構(gòu)建等研究。

4. 誘導(dǎo)多能干細胞（iPSC）培養(yǎng)

配合無血清培養(yǎng)基使用，支持 iPSC 的維持培養(yǎng)與定向分化，降低 FBS 帶來的異種蛋白干擾，提升細胞產(chǎn)品的安全性與一致性，建議結(jié)合具體實驗場景優(yōu)化使用條件。

5. 外泌體制備與細胞治療工藝開發(fā)

HPL 來源的外泌體背景低、人源化程度高，適合作為細胞培養(yǎng)補充劑用于外泌體生產(chǎn)；同時也是細胞治療產(chǎn)品工藝開發(fā)、IND 申報前研究階段的理想選擇。

6. 原代細胞與 3D 細胞培養(yǎng)

對多種人源原代細胞（成纖維細胞、角質(zhì)形成細胞等）具有良好的培養(yǎng)效果，也可適配 3D 懸浮培養(yǎng)、類器官培養(yǎng)等新型培養(yǎng)體系，建議結(jié)合具體實驗場景優(yōu)化使用條件。

04    常見問題解答

Q1：HPL 培養(yǎng)細胞時出現(xiàn)凝膠 / 絮狀沉淀是什么原因？如何解決？

A：這是 HPL 使用中最常見的現(xiàn)象，主要原因是纖維蛋白原與培養(yǎng)基中的鈣離子結(jié)合發(fā)生凝固。• 若使用標準型 HPL：檢查是否已按要求添加肝素鈉，建議終濃度 2 U/mL；若已添加仍有凝膠，可適當(dāng)提高肝素濃度至 3-5 U/mL• 若使用去纖維蛋白原型：通常不會出現(xiàn)明顯凝膠，少量沉淀屬正常蛋白析出主要是凍融引起，建議直接在37度水浴解凍，可有效減少析出。• 已形成凝膠的培養(yǎng)基可通過 0.22 μm 濾膜過濾后繼續(xù)使用，或 3500 g 離心 10 分鐘取上清

Q2：HPL 的最佳使用濃度是多少？濃度越高越好嗎？

A：常規(guī)推薦濃度為 5%，但并非越高越好。HPL 中生長因子濃度很高，部分細胞（如 MSC）在過高濃度（>10%）下反而會出現(xiàn)生長抑制或分化傾向。建議初次使用時設(shè)置 2%-10% 的濃度梯度，根據(jù)細胞狀態(tài)確定最-優(yōu)濃度。多數(shù)細胞類型在 5% 濃度下即可達到甚至優(yōu)于 10% FBS 的培養(yǎng)效果。

Q3：從 FBS 體系換成 HPL，細胞需要適應(yīng)嗎？直接替換可以嗎？

A：建議采用梯度適應(yīng)法平穩(wěn)過渡，尤其是對血清依賴性較強的細胞。可按 FBS:HPL = 3:1 → 1:1 → 1:3 → 全 HPL 的順序逐步替換，每步傳代 1-2 次。適應(yīng)性強的細胞（如部分細胞系）也可直接替換，但建議提前做小量預(yù)實驗驗證。

Q4：HPL 解凍后有沉淀正常嗎？會影響效果嗎？

A：完-全正常。HPL 中含有大量血漿蛋白與纖維蛋白成分，凍融后出現(xiàn)微量絮狀或顆粒狀沉淀屬于正常現(xiàn)象，不影響生長因子活性與培養(yǎng)效果。可輕輕混勻后直接使用，若介意外觀可離心取上清或配成培養(yǎng)基后過濾。

Q5：HPL 可以用于細胞凍存嗎？

A：可以。HPL 可替代 FBS 用于細胞凍存液配制，推薦在凍存液中添加 10%-20% HPL，配合 DMSO 使用，能夠有效提升細胞復(fù)蘇存活率。凍存配方參考：基礎(chǔ)培養(yǎng)基 + 10% DMSO+20% HPL。

Q6：IPHASE 的 HPL 是科研級，和 GMP 級有什么區(qū)別？

A：目前 IPHASE 推出的為科研級（RUO）產(chǎn)品，滿足實驗室基礎(chǔ)研究與工藝開發(fā)需求，原料與生產(chǎn)均執(zhí)行嚴格的質(zhì)量控制標準。GMP 級產(chǎn)品需在符合 GMP 規(guī)范的車間生產(chǎn)，并配套完整的批生產(chǎn)記錄與溯源體系，主要用于臨床級細胞制備。后續(xù) IPHASE 將根據(jù)市場需求推進 GMP 級產(chǎn)品管線。

IPHASE 匯智和源始終專注于生物醫(yī)藥領(lǐng)域試劑與工具的研發(fā)創(chuàng)新，本次人血小板裂解液新品的推出，進一步完-善了細胞培養(yǎng)試劑產(chǎn)品線，為廣大科研工作者與生物技術(shù)企業(yè)提供高性價比的國產(chǎn)替代選擇。如需產(chǎn)品試用裝或技術(shù)咨詢，歡迎聯(lián)系 IPHASE 技術(shù)支持團隊。

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