主要用于結核病(Tuberculosis, TB)的輔助診斷和潛伏感染篩查。其核心原理是檢測人體免疫系統(特別是T細胞)對結核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis, MTB)
特異性抗原的應答反應。
核心原理
當人體感染結核分枝桿菌后,體內的特異性T淋巴細胞會“記住"這種細菌的特定抗原(如ESAT-6, CFP-10, TB7.7等)。當這些T細胞在體外再次接觸到相同的抗原時,
會被激活并產生反應,主要是:
1. 釋放細胞因子:如γ-干擾素(IFN-γ)。
2. 增殖:T細胞數量增加。
目前的檢測方法正是基于測量這種反應強度來判斷機體是否曾經感染過結核菌。
主要檢測方法
目前臨床應用最GUANG泛的是**γ-干擾素釋放試驗**(Interferon-Gamma Release Assays, IGRAs)。
1. γ-干擾素釋放試驗 (IGRAs)
IGRAs是一種體外血液檢測技術。它通過測量受試者全血或分離的單核細胞在受到MTB特異性抗原刺激后所產生的IFN-γ水平,來判斷是否存在結核感染。
商用試劑盒:
T-SPOT.TB: 采用ELISPOT技術,計數分泌IFN-γ的T細胞數量(斑點形成細胞數)。
檢測流程簡述:
1. 采血:采集患者靜脈血。
2. 孵育刺激:將血液分別加入不同的培養管中:
* 陰性對照管(Nil):不含抗原,測量本底值。
* 陽性對照管(Mitogen):含有非特異性刺激物,確認免疫細胞功能正常。
* 抗原管(TB Antigen):含有MTB特異性抗原(ESAT-6, CFP-10等)。
3. 孵育:在37℃下培養16-24小時。
4. 檢測:使用Bioreader ELISPOT設備測量IFN-γ的水平。
5. 結果判讀:
* 陽性:抗原管反應值減去陰性對照管值后,超過特定閾值。提示存在結核感染(潛伏性或活動性)。
* 陰性:抗原管反應值很低,且陽性對照管反應正常。提示 likely 未感染。
* 不確定/無效:陽性對照管反應過低(可能提示免疫系統功能受損)或陰性對照管值過高。結果無法判斷。
與結核菌素皮膚試驗(TST)的對比
| 特性 | γ-干擾素釋放試驗 (IGRAs) | 結核菌素皮膚試驗 (TST/Mantoux Test) |
| 原理 | 檢測體外血液中T細胞對特異性抗原的IFN-γ反應 | 檢測體內對結核菌素衍生物(PPD)的遲發型超敏反應 |
| 抗原 | MTB特異性抗原(ESAT-6, CFP-10等),與BCG和大多數非結核分枝桿菌無交叉反應 | PPD,為多種分枝桿菌共有的抗原,與BCG接種和多數非結核分枝桿菌感染有交叉反應 |
| 操作 | 抽血,一次完成,體外實驗 | 皮內注射,需48-72小時后回醫院判讀結果 |
| 主觀性 | 客觀,由機器量化檢測 | 主觀**,依賴操作者的注射技術和判讀者的經驗 |
| 優點 | 特異性高、不受BCG接種影響、無需二次就診、結果客觀 | 價格低廉、操作簡單、無需特殊設備 |
| 缺點 | 價格昂貴、需要實驗室設備、血液樣本運輸和處理要求高 | 特異性較低、需二次就診、受BCG接種影響大、主觀性強 |
臨床應用與意義
1. 潛伏性結核感染(LTBI)的診斷與篩查:
這是IGRAs最主要的用途。用于篩查結核病高危人群(如HIV感染者、器GUAN移ZHI前、使用免疫抑制劑前、醫務工作者等)。IG陽性表明感染了結核菌,但未發病,
需要評估是否進行預防性治療。
2. 活動性結核病的輔助診斷:
可用于支持活動性結核病的診斷,但**不能區分潛伏感染和活動性結核。
陰性結果有助于排除結核感染(尤其是在免疫健全的個體中),但免疫功能低下者(如艾滋病患者)可能出現假陰性。
不能單獨用于診斷活動性結核,必須結合臨床癥狀、影像學(如胸部X光)、痰涂片和痰培養等結果綜合判斷。
3. 特殊人群的應用:
兒童:可用于兒童結核病的診斷,但年齡越小(尤其是<5歲),免疫系統越不成熟,檢測性能可能下降。
免疫抑制人群:HIV感染者、器GUAN移ZHI者等,IGRAs的敏感性可能會降低,可能出現假陰性。
優點與局限性
優點:
高特異性:不受卡介苗(BCG)接種史的影響,與非結核分枝桿菌的交叉反應少。
高敏感性:對活動性結核病和潛伏感染有較好的敏感性。
便捷性:只需一次抽血,患者依從性好。
客觀性:結果量化,減少人為誤差。
局限性:
無法區分LTBI與活動性TB:這是最大的局限性。陽性結果只能說明有感染,但不能判斷是潛伏還是活動。
成本高:檢測費用遠高于TST。
技術要求高:需要專業的實驗室設備和人員,血液樣本需要在規定時間內處理。
在免疫抑制人群中可能出現假陰性。
存在灰色地帶:有少數不確定結果,需要重新評估或檢測。
|
| |
| 酶聯免疫斑點分析儀 | 酶聯免疫熒光斑點分析儀 |
結核分枝桿菌特異性細胞免疫反應檢測(主要指IGRAs)是現代結核病防控中的重要工具。它通過檢測T細胞對MTB特異性抗原的記憶反應,實現了對結核感染
的高特異性和高敏感性診斷。盡管它不能區分潛伏感染和活動性疾病,但其高特異性使其在卡介苗接種普遍的地區和用于特定人群篩查時,價值尤為突出。醫生
會根據患者的具體情況,選擇TST或IGRAs,或二者聯合使用,并結合其他檢查結果來做出綜合判斷。
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業自行提供,信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業負責,化工儀器網對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規避購買風險,建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。