糖尿病（DM）是一類高發且致殘性代謝疾病，常伴隨嚴重血管病變，包括腦卒中、視網膜病變以及腦微出血（CMBs）。腦微出血是大腦皮質毛細血管與穿通小動脈自發性破裂形成的病灶，因無明顯臨床癥狀，往往不易被察覺。但血管破裂會釋放血漿內鐵、纖維蛋白原等毒性物質，破壞周邊神經元環路。這類損傷可自發發生并終身累積，因此腦微出血負荷與認知衰退、癡呆發病及病情進展密切相關。1 型糖尿病（T1DM）患者發生腦微出血與血管病變的風險顯著升高，且胰島素治療無法逆轉該類病理損傷，因此亟需發掘全新干預策略，修復糖尿病損傷的腦部血管。

受損或破裂血管的修復依賴大腦募集中樞原位及外周免疫細胞。小膠質細胞是一類起源于卵黃囊、定居于中樞神經系統的特異性巨噬細胞。血管損傷發生數分鐘內，小膠質細胞便會伸出突起包裹受損微血管，阻擋毒性血漿外滲，恢復血腦屏障（BBB）完整性，該作用可持續數日。原位小膠質細胞是聚集至受損微血管的主要免疫細胞；穩態下血腦屏障會阻隔外周巨噬細胞，但少量外周浸潤巨噬細胞同樣會響應血管損傷。近期活體成像研究證實，少量循環巨噬細胞可在損傷發生 24～48 小時內募集至腦微出血病灶，并在此處滯留數天。在生理及病理狀態下，小膠質細胞與浸潤巨噬細胞兼具保護與損傷雙重作用，可表現促炎、抗炎兩種極化表型。例如，浸潤巨噬細胞既可參與破損血管修復、重塑血管結構，也可攻擊并吞噬受損血管。與之類似，小膠質細胞在損傷初期通常發揮修復保護作用，但隨病程延長，可能加重腦損傷、促進神經元與血管退行性病變。原位小膠質細胞與外周巨噬細胞均會募集至損傷灶，但兩類細胞如何決定受損微血管的最終轉歸（血管再通留存或崩解），仍是亟待闡明的關鍵科學問題。此外，1 型糖尿病這類慢性炎癥疾病會提升血管損傷風險，但其如何調控小膠質細胞 / 巨噬細胞募集、進而影響血管修復進程，目前尚不明確。

本團隊前期對健康小鼠開展實驗：采用飛秒激光活體誘導微血管破裂后，在為期 14 天的活體觀測周期內，所有受損血管均實現再通并穩定留存。但對 1 型糖尿病小鼠施加同等血管損傷后，部分受損微血管最終發生消融。本研究利用兩種模型血管修復結局的差異，探究調控微血管修復的細胞分子機制，重點解析糖尿病這類慢性炎癥血管病背景下的調控規律。通過分析腦微出血損傷后的基因表達譜，并借助免疫組化鑒定病灶募集的細胞亞群，我們發現糖尿病小鼠腦組織中存在半乳糖凝集素 3（Gal3）陽性巨噬細胞；該類細胞高表達吞噬相關標志物，且大量聚集于最終消融的血管病灶處。本研究結果與既往單細胞轉錄組研究結論相互印證：疾病或衰老狀態下免疫細胞上調 Lgals3（Gal3 編碼基因）表達，與阿米巴樣吞噬型細胞表型高度相關。通過全身注射荷蘭Liposoma氯膦酸脂質體（ClodronateLiposomes：CLR，C-005）清除絕大部分外周吞噬型白細胞后，Gal3 陽性巨噬細胞無法在腦微出血病灶周圍聚集，糖尿病小鼠的微血管修復能力顯著改善。綜上，本研究揭示了腦血管損傷后復雜的細胞應答網絡，并First證實 Gal3 陽性巨噬細胞可介導腦部微血管消融，具備全新病理調控功能。

清除巨噬細胞，金標準產品就是荷蘭Liposoma的巨噬細胞清除劑氯膦酸鹽脂質體ClodronateLiposomes，通過靜脈注射，可以清除骨髓，肝臟，脾臟多個部位的駐留巨噬細胞，因此，有一個問題，巨噬細胞清除劑氯膦酸鹽脂質體ClodronateLiposomes靜脈注射會影響小膠質細胞嗎？答案：不會

論文信息：

論文題目：Invasion of phagocytic Galectin 3 expressing macrophages in the diabetic brain disrupts vascular repair

期刊名稱：Science Advances

時間期卷：Vol 7, Issue34(2021)

在線時間：2021年8月18日

DOI: 10.1126/sciadv.abg2712

產品信息：

貨號：CP-005-005

規格：5ml+5ml

品牌：Liposoma

產地：荷蘭

名稱：Clodronate Liposomes&Control Liposomes

辦事處：靶點科技

Clodronate Liposomes氯膦酸鹽脂質體靜脈注射，清除外周巨噬細胞。荷蘭Liposoma巨噬細胞清除劑ClodronateLiposomes見刊于Science Advances：吞噬型半乳糖凝集素 3 陽性巨噬細胞浸潤糖尿病小鼠腦組織會阻礙血管修復。

Liposoma巨噬細胞清除劑Clodronate Liposomes氯膦酸二鈉脂質體清除巨噬細胞的材料和方法：

In vivo macrophage depletion

For drug intervention experiments, mice received intravenous CLR (50 mg/kg; Liposoma B.V.) 2 days before CMB induction, on the day of CMB induction, and 2 days later. This treatment regimen ensured sustained depletion of peripheral macrophages. Diff-Quik histological staining confirmed depletion of circulating immune cells in treated animals.

藥物干預實驗中，于腦微出血造模前 2 天、造模當日及造模后 2 天，對小鼠尾靜脈注射氯膦酸二鈉脂質體（CLR，給藥劑量 50 mg/kg，廠商：Liposoma B.V.）。該給藥方案可實現外周巨噬細胞的持續性清除。經迪夫快速（Diff-Quik）組織染色驗證，給藥小鼠外周循環免疫細胞已被有效清除。

巨噬細胞清除材料和方法文獻截圖：吞噬型半乳糖凝集素 3 陽性巨噬細胞浸潤糖尿病小鼠腦組織會阻礙血管修復