為了明確特定巨噬細胞亞群的具體貢獻,研究者利用荷蘭Liposoma氯膦酸鹽脂質體(CLL)處理后SIGN-R1?巨噬細胞恢復速度較慢的特點,研究了一個時間窗口——在此窗口期內SIGN-R1?MARCO?細胞缺失,但SIGN-R1?MARCO?細胞和CD169?細胞均已恢復(7)。在CLL給藥后3周,小鼠過繼轉移MD4 B細胞和OT-II T細胞并按上述方案進行免疫。對照組動物接受磷酸鹽緩沖液(PBS)包被的脂質體(PBS-L)處理,該處理對生發中心B細胞反應無顯著影響(圖2C)。免疫熒光(IF)分析證實,在CLL處理的小鼠中SIGN-R1?巨噬細胞被選擇性清除,但CD169?和MARCO?細胞未被清除(圖2A)。邊緣區B細胞的頻率也與對照組處理動物相似,證實其已恢復(圖2B)。選擇性清除SIGN-R1?巨噬細胞足以損害生發中心反應并降低生發中心B細胞頻率,這與在DT處理的CD169-DTR動物中觀察到的缺陷相似(圖2C)。

SIGN-R1?巨噬細胞的耗竭損害生發中心B細胞反應。(A–E) 在過繼轉移OT-II T細胞和CD45.1? MD4 B細胞之前3周,受體小鼠經靜脈注射氯膦酸鹽脂質體(CLL)或PBS脂質體(PBS-L),隨后進行HEL-OVA免疫。8天后分析脾臟。(A) 經免疫的PBS-L處理組和CLL處理組小鼠脾臟切片的免疫熒光分析。白色方框標示右側所示的高倍放大視圖。(B) 邊緣區B細胞的頻率。(C) HEL特異性生發中心B細胞的頻率。A–C中的數據代表至少五次獨立實驗中的一次。“未處理"組為未接受CLL或PBS-L的免疫小鼠。(D) 小鼠經CLL或PBS-L處理,3周后以Ribi佐劑中的PE進行腹腔免疫。(左)用于確定PE?生發中心B細胞頻率的門控策略。(右)免疫后10天B細胞區室中PE特異性生發中心B細胞的頻率。數據代表三次獨立實驗中的一次。(E) 在流感病毒鼻內感染前3周經PBS-L或CLL處理的小鼠,其脾臟(左)和縱隔淋巴結(右)中生發中心B細胞的頻率。生發中心B細胞在感染后10天鑒定為B220?IgD^lowFAS?GL7?活細胞。數據代表兩次獨立實驗中的一次。(F) SIGN-R1-Cre/DTR?/?dTomato?/?小鼠脾臟切片的免疫熒光分析。(G) 經DT處理或未處理的SIGN-R1-Cre/DTR?/?小鼠的脾臟。(H和I) 經PE免疫后7天,DT處理或未處理的SIGN-R1-Cre/DTR?/?小鼠脾臟中生發中心B細胞反應。(H) 按所示染色的免疫熒光分析。(I) PE特異性生發中心B細胞的門控策略(左)和頻率(右)。數據來自所進行的三次實驗中的一次代表性實驗。A和F–H中分析的切片來自每次實驗每組至少三只小鼠。
脾臟邊緣區巨噬細胞MZM的Marker:SIGN-R1 (CD209b)+,MARCO+
脾臟邊緣區噬金屬性巨噬細胞MMM的Marker:CD169 (Siglec-1)+,MOMA-1抗體來檢測CD169的表達。
MOMA-1本身并不是一個分子,而是一種單克隆抗體的名字,用于識別和標記小鼠體內的特定巨噬細胞。它識別并結合的靶標分子是 CD169(也叫唾液酸黏附素或 Siglec-1)。
● 名稱由來:MOMA 是 "Monocytes and Macrophages"(單核細胞和巨噬細胞)的縮寫。它是由研究者 Kraal 和 Janse 在1986年報道的一種抗體。
● 靶標分子:MOMA-1抗體所識別的抗原,在很長一段時間內都是未知的。直到2006年,研究才證實它的靶標就是CD169(Sialoadhesin)。
● 應用場景:在免疫學研究中,MOMA-1是識別脾臟中邊緣區嗜金屬巨噬細胞(MMMs) 的經典工具。它也常被用于標記淋巴結、腸道固有層等其他組織中的特定巨噬細胞亞群。
論文信息:
論文題目:Marginal zone SIGN-R1+ macrophages are essential for the maturation of germinal center B cells in the spleen
期刊名稱:PNAS
時間期卷:117 (22) 12295-12305
DOI: 10.1073/pnas.1921673117
產品信息:
貨號:CP-010-010
規格:10ml+10ml
品牌:Liposoma
產地:荷蘭
名稱:Clodronate Liposomes&Control Liposomes
辦事處:靶點科技
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