當前位置:青島高科技工業園海博生物有限公司>>技術文章>>卵黃的作用及使用注意事項
一、卵黃的作用
許多培養基制備時,都會用到卵黃。一方面,卵黃具有豐富的營養,可以支持一些營養苛求型細菌的生長,如培養奈瑟氏菌的卵黃雙抗培養基、培養分枝桿菌的羅氏培養基等,添加的卵黃做為營養補充劑,可以促進細菌的快速生長;另一方面,卵黃中含有豐富的卵磷脂和脂肪可以檢測細菌的生化特性,能夠分解脂肪和卵磷脂的細菌在含卵黃的培養基上菌落周圍能夠產生暈圈。
二、卵黃的制備
通常情況下,雞蛋中的蛋黃是無菌的,使用消毒劑對雞蛋表面擦拭或浸泡消毒以后,用無盡鑷子敲碎雞蛋,輕輕搖晃盡可能倒掉蛋清,留下蛋黃倒入含有無菌玻璃珠的錐形瓶中,加入等量體積的生理鹽水混合均勻(通常一個蛋黃約15-20g),即為50%的卵黃乳液。
注:宜采用新鮮雞蛋,有些雞蛋的蛋黃存在污染的可能性,制備好的卵黃乳液宜當天使用。若蛋黃出現散黃、異味等現象,則不應使用。
三、卵黃的保存
為盡可能延長卵黃的保存時間,應將制備好的卵黃乳液置于2-8℃冰箱中冷藏保存。對于自行制備的卵黃乳液在進行長期保存時,臨用前應對無菌性進行檢查(可取少量卵黃乳液涂布至TSA平板培養1-2天),若出現污染則不能使用。
注:自制的卵黃污染風險相對較高,一般建議使用商品化生產的無菌卵黃乳液,可以更久的儲存。
四、卵黃的使用
卵黃受熱過度會變性凝固,因此卵黃通常要在培養基滅菌后冷卻至50℃左右時加入(液體培養基可以冷卻至更低的溫度時添加),加入卵黃后的培養基不可繼續保溫或者凝固后復融使用,大多數培養基中卵黃的添加量為5%-15%。
注:由于卵黃通常在2-8℃儲存,在往培養基中添加之前需平衡至室溫(或溫水浴至40℃)再使用,防止培養基接觸過冷的卵黃出現凝塊。培養基的溫度也不能過高,防止加入的卵黃出現變性。加入卵黃后的培養基應輕輕搖勻,避免產生過多氣泡,影響使用效果。
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