一、用途:
用于副溶血性弧菌生化鑒定。
二、實驗原理:
某些細菌可產生精氨酸脫羧酶,使精氨酸脫去羧基,生成精胺,從而使培養基變堿性并通過指示劑變色來觀察。脫羧酶是適應酶或稱誘導酶,對底物有特異性,在無相對氨基酸的培養基中不產生此酶,并且需要酸性環境和適宜溫度。故在培養基中加入葡萄糖,使細菌發酵葡萄糖產酸,以利于脫羧酶的產生。氨基酸的分解是在厭氧條件下進行,故在培養基表面加液體石蠟。由于細菌發酵葡萄糖產酸,在培養初期培養基和對照培養基呈黃色,繼續培養時,若氨基酸經脫羧或水解產生胺類則培養基變堿,呈紫色或紫紅色,即為陽性反應;如至培養末期培養基如同對照管一樣均呈黃色,則判為陰性反應。
二、培養基成分(g/L):
酵母浸粉 | 3.0 |
L-精氨酸 | 5.0 |
葡萄糖 | 1.0 |
溴甲酚紫 | 0.016 |
氯化鈉 | 30.0 |
pH 6.7±0.1 25℃ | |
四、試驗方法:
1. 將標準儲備菌株接種到非選擇性肉湯中或采用其他制備方法,制備成5 McFarland濁度(約109CFU/ml)的菌懸液。
2. 吸取0.05ml-0.08ml(約1-2滴)菌懸液至生化管中,并覆蓋一層無菌液體石蠟,并同時做無氨基酸對照生化管,36±1℃培養24±2h后,觀察實驗結果。
五、微生物試驗:
接種以下質控菌株,36±1℃培養24±2h:
質控菌株 | 菌株編號 | 生長情況 | 其他特征 |
副溶血性弧菌 | ATCC17802 | +++ | 陰性,黃色 |
普通變形桿菌 | ATCC13315 | +++ | 陰性,黃色 |
溶藻弧菌 | ATCC17749 | +++ | 陰性,黃色 |
阪崎腸桿菌 | ATCC29004 | +++ | 陽性,紫色 |
創傷弧菌 | ATCC27562 | +++ | 陰性,黃色 |
六、方法的局限性
本培養基僅為細菌鑒定的一部分,需做其他補充試驗。
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