SV-HUC-1細胞復蘇平衡后怎樣判斷其狀態

閱讀：581 發布時間：2022-12-19

細胞基本信息

細胞名稱：SV-HUC-1(人輸尿管上皮永生化細胞)

細胞別稱：HUC-1; SV-HUC; SVHUC

細胞類型：上皮細胞

生長特性：貼壁

培養條件：F12K+10% FBS+1% P/S

培養環境：空氣，95%；二氧化碳 (CO2)，5%

細胞簡介：SV-HUC-1細胞是11歲男性的正常輸尿管組織用SV40病毒轉染建株的，細胞尿上皮角蛋白、SV40 T抗原陽性。SV-HUC-1細胞經反復用非洲綠猴腎細胞平板測試檢測傳染性SV40，結果都呈陰性，但在脅迫(如曝露于化學試劑)下可能激活SV40病毒。SV-HUC-1細胞可以用于3D細胞培養。

SV-HUC-1細胞正常生長形態照片（40x、100x）

SV-HUC-1細胞操作實例

客戶提問：

SV-HUC-1細胞剛收到的復蘇細胞平衡后麻煩看下狀態

小尚回答：

目前從圖片上觀察細胞狀態良好，密度在80%左右，平衡完成后及時消化傳代，初次傳代建議1:2傳代。該細胞消化時間較長，注意延長消化時間。對于消化這步，客戶如果對該細胞經驗不多，無法準確掌控胰酶作用時間，建議客戶按照下述操作：

胰酶首先復溫到室溫后加入細胞，放入37度培養箱，然后每隔30秒，即吹打下細胞（此時吹打細胞應盡量輕柔，不能強行將細胞吹下，否則細胞可能出現機械損傷），如果能夠吹打散細胞，說明細胞消化完成可以終止消化，如果30秒吹打不下，再等30秒重復操作。

消化完成后加3-4ML培養基終止消化，混勻細胞，收集細胞懸液900-1000rpm離心3min，棄上清。再加5ml PBS重懸細胞，再離心后，用培養基重懸接種到新的培養皿。第二次PBS重懸是為了去除碎片，如果平時碎片比較少，傳代時可以省略PBS重懸的步驟；如果碎片很多，建議PBS多洗一次。

傳代24h后可以觀察細胞，若死亡細胞及碎片較多建議PBS潤洗下貼壁的細胞，再加新的培養基繼續培養。

注意事項

SV-HUC-1細胞對pH值敏感，注意加多些培養基培養，培養變黃后及時換液。平時培養建議T25瓶加10ml培養基，10cm皿加12-15ml，密度60%以下2-3天換液一次，密度60-80%時隔一天換液一次，80%以上每天換液。以維持相對穩定的培養條件。特別是密度高的時候，留意培養基是否變黃，培養基變黃要及時換液。

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