基本信息

碘乙酰基-LC-生物素（Iodoacetyl-LC-Biotin，CAS號93285-75-7）是一種巰基特異性生物素化試劑，分子結構包含三部分：

• 生物素基團：與鏈霉親和素/親和素強特異性結合

• 長鏈（LC）連接臂：減少空間位阻，提高標記效率

• 碘乙酰基末端：與巰基不可逆共價結合

物理性質：

• 外觀：淡黃色至橙色固體粉末

• 溶解性：易溶于DMSO、DMF等有機溶劑，水中溶解度有限

• 儲存：-20℃避光干燥保存，避免反復凍融

結構式：

化學特性

1. 巰基特異性反應

• 在pH7-8的緩沖液中，碘乙酰基可與蛋白質/小分子中的游離巰基發生SN2反應

• 形成穩定的硫醚鍵（C-S），反應過程無需輔助因子

2. 不可逆結合

• 與二硫吡啶-生物素的可逆結合不同，碘乙酰基形成的硫醚鍵非常穩定

• 可耐受還原劑處理，適合后續的苛刻實驗條件

3. 親和富集能力

• 生物素-鏈霉親和素結合常數達101? M?1，結合力較強

• 可在復雜樣本中特異性捕獲低豐度巰基蛋白

應用場景

1. 蛋白質巰基標記

• 特異性標記蛋白質半胱氨酸殘基

• 用于后續的親和純化、熒光檢測或質譜分析

2. 蛋白質相互作用研究

• 制備生物素化探針，通過拉下實驗（Pull-down）篩選互作蛋白

• 結合質譜技術分析蛋白質復合物組成

3. 細胞表面蛋白分析

• 標記細胞膜上的巰基化蛋白

• 用于免疫熒光成像、流式細胞分析

4. 藥物研發

• 抗體-藥物偶聯物（ADC）的制備

• 靶點蛋白的選擇性標記與功能研究

使用注意事項

1. 溶劑選擇：需先溶于DMSO或DMF，再加入水性反應體系

2. 反應條件：pH7-8的緩沖環境最適宜，避免強酸強堿

3. 還原劑兼容性：標記后樣品可耐受還原劑處理

4. 實驗設計：根據目標蛋白特性選擇合適的反應時間與試劑濃度

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