概述

Biotin-L-Hydroxyproline，生物素-羥脯氨酸是將維生素H（生物素）與L-羥脯氨酸（Hyp）通過共價鍵偶聯形成的雙功能分子探針。它融合了羥脯氨酸的結構特異性與生物素的較強親和識別能力，本質上是一個"雙重識別"工具：羥脯氨酸端可模擬天然膠原相關分子的結合行為，生物素端則通過鏈霉親和素體系實現高效捕獲、檢測和固定。

基本信息

中文名：生物素-羥脯氨酸（生物素偶聯羥脯氨酸）
英文名：Biotin-Hydroxyproline / Biotin-Hyp


純度：≥95%
外觀：白色至淡黃色固體/粉末
溶解性：溶于 PBS、Tris 緩沖液、DMSO，水中溶解度適中
儲存條件：-20°C，避光，干燥，密封保存

結構解析

生物素端：含噻唑環與咪唑環稠合的雙環結構，羧基端通過活化（NHS酯等）與羥脯氨酸的α-氨基形成穩定酰胺鍵。羧基可與鏈霉親和素以 Kd ≈ 10?1? M 的較高親和力結合，幾乎不可逆。

羥脯氨酸端：L-構型吡咯烷環，5位碳上帶有羥基（–OH），α-氨基用于與生物素偶聯，α-羧基保留游離。環狀結構提供空間剛性，羥基可參與氫鍵形成或進一步化學修飾。

連接方式：最常見的是生物素羧基 → NHS酯活化 → 與L-Hyp的α-氨基形成酰胺鍵。也有通過羥脯氨酸羥基端偶聯的版本（酯鍵連接）。

用途

1. 膠原相關蛋白的標記與捕獲

羥脯氨酸是膠原蛋白的特征性氨基酸（約占膠原氨基酸總量13%），Biotin-Hyp可作為"誘餌分子"模擬天然羥脯氨酸的結合行為，用于pull-down實驗富集與膠原代謝相關的結合蛋白或復合物。

2. 蛋白質/多肽的生物素化標記

通過羥脯氨酸端與含羥脯氨酸序列的多肽或膠原蛋白共價修飾，生物素端再與鏈霉親和素-熒光染料/酶/納米顆粒結合，實現可視化追蹤或功能檢測。適用于免疫印跡、免疫沉淀、ELISA、流式細胞分析。

3. 納米載體與表面功能化

生物素端可固定在親和素修飾的納米顆粒、脂質體或芯片表面，實現靶向遞送。羥脯氨酸的環狀剛性有助于提高功能化界面的有序性，減少非特異性吸附。

4. 熒光標記與生物追蹤

與熒光標記鏈霉親和素偶聯后，可實現細胞水平、組織水平乃至活體成像的可視化分析。羥脯氨酸環狀骨架保持分子空間構象，避免熒光淬滅和非特異性結合。

5. 酶底物分析與代謝研究

由于羥脯氨酸并非直接由遺傳密碼編碼，而是脯氨酸經脯氨酰羥化酶（需維生素C輔助）翻譯后修飾生成，Biotin-Hyp可用于研究羥脯氨酸代謝通路、膠原合成與降解過程。

6. 組織工程與再生醫學

在細胞培養體系中可作為潛在的細胞功能調節劑，影響細胞外基質的合成與重塑，調控細胞生長、增殖與分化。

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