使用厭氧培養(yǎng)箱時(shí)需嚴(yán)格遵守操作規(guī)程以確保實(shí)驗(yàn)安全和培養(yǎng)效果,以下是關(guān)鍵注意事項(xiàng):
1. 環(huán)境準(zhǔn)備
放置位置:選擇通風(fēng)良好、避免陽光直射的平穩(wěn)臺(tái)面,遠(yuǎn)離易燃物和震動(dòng)源。
清潔消毒:使用前用75%酒精或?qū)S孟緞┎潦脙?nèi)腔及手套,避免污染。
2. 氣體管理
氣體純度:確保使用高純度厭氧氣體(如N?、H?、CO?混合氣),雜質(zhì)(如O?)含量需低于0.1%。
氣體置換:
*次使用或長期未用時(shí),需多次抽真空 充氣循環(huán)(通常3 5次)確保厭氧環(huán)境。
操作完成后,再次置換氣體以維持箱內(nèi)低氧狀態(tài)。
泄漏檢查:定期用肥皂水檢測管路和接頭,防止氣體泄漏(尤其注意氫氣易燃風(fēng)險(xiǎn))。
3. 操作規(guī)范
樣品進(jìn)出:
通過傳遞艙轉(zhuǎn)移樣品,避免直接暴露于空氣。傳遞后需重新置換氣體。
傳遞艙使用前后需抽真空并充惰性氣體(如N?)。
手套使用:
佩戴前檢查有無破損,操作時(shí)緩慢移動(dòng)以減少氣流擾動(dòng)。
避免尖銳物品劃傷手套或箱體內(nèi)壁。
4. 參數(shù)監(jiān)控
氧氣濃度:持續(xù)監(jiān)測并確保O?濃度≤1%(通常用鈀催化劑或氧傳感器)。
溫濕度控制:
溫度根據(jù)菌種需求設(shè)定(如35 37℃),每日校準(zhǔn)。
濕度維持在80 90%,防止培養(yǎng)基干燥(可放置水盤或使用加濕器)。
5. 安全措施
防爆設(shè)計(jì):若含氫氣(H?),確保箱體防爆且遠(yuǎn)離明火/靜電。
應(yīng)急處理:
突發(fā)停電時(shí),關(guān)閉氣閥,避免氣體倒灌。
如氧氣濃度異常升高,立即停止實(shí)驗(yàn)并排查原因。
6. 維護(hù)與保養(yǎng)
催化劑再生:鈀催化劑定期160℃烘烤2小時(shí)以恢復(fù)活性(若使用)。
密封檢查:定期更換門封條和手套,保持氣密性。
系統(tǒng)清潔:每月清理內(nèi)腔,避免代謝產(chǎn)物積累。
7. 生物安全
處理病原微生物時(shí),需在箱內(nèi)進(jìn)行消毒(如紫外照射或消毒劑噴霧),廢棄物需滅菌后移出。
常見問題處理:
氧氣殘留:檢查密封性,延長置換時(shí)間或更換催化劑。
污染:*底消毒箱體,檢查手套和傳遞艙密封性。

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