土壤酸性木聚糖酶（Soil Acidic Xylanase，S-ACX）測定試劑盒說明書

時間：2025/1/16閱讀：1182

土壤酸性木聚糖酶（Soil Acidic Xylanase，S-ACX）測定

試劑盒說明書

分光光度法 50 管/24 樣

正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定測定意義：

木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物產生，能催化水解木聚糖，也被稱為戊聚糖酶或半纖維素酶，可分解釀造或飼料工業中的原料細胞壁以及β-葡聚糖，降低釀造中物料的粘度，促進有效物質的釋放，以及降低飼料中的非淀粉多糖，促進營養物質的吸收利用，因而廣泛的應用于釀造和飼料工業中，ACX 一般分離自耐酸的真菌，細菌及部分霉菌。

測定原理：

ACX 在酸性環境下能將木聚糖降解成還原性寡糖和單糖，進一步在沸水浴條件下與 3,5-二硝基水楊酸發生顯色反應，在 540nm 處有特征吸收峰，反應液顏色的深淺與酶解產生的還原糖量成正比，通過測定反應液在 540nm 吸光值增加速率，可計算ACX 活力。

組成：

產品名稱	BO6088-50T/24S	Storage
緩沖液：液體	20ml	4℃
試劑一：液體	5ml	4℃避光
試劑二：液體	25ml	4℃避光
說明書	一份

試劑三：粉劑×1 瓶，-20 ℃保存，用時加入 4ml 蒸餾水，混勻，用不完的試劑 4℃保存一周；試劑四：粉劑×1 瓶，4 ℃保存，用時加入 4ml 蒸餾水，混勻，用不完的試劑 4℃保存一周；自備儀器和用品：

天平、常溫離心機、震蕩儀、恒溫水浴鍋，可見分光光度計、1 ml 玻璃比色皿。

樣品處理：

新鮮土樣風干，過 30-50 目篩。

測定操作表：

	對照管	測定管
土樣（g）	0.1	0.1
緩沖液（μl）	600	400
試劑一（μl）		200
混勻，50℃震蕩反應 30min，立即 90℃水浴 10min，8000g，25℃離心 10min，取上清 500μl
試劑二（μl）	500	500
混勻，90℃水浴中顯色 5min，1ml 玻璃比色皿，對照管調零，測定A540。

S-ACX 計算公式：

標準曲線：y = 2.5554x - 0.002 ，R² = 0.9983

酶活定義：50℃，pH4.8 條件下，每克土壤每天分解木聚糖產生 1μmol 還原糖所需的酶量為一個酶活單位。

S-ACX 活力（μmol/d/g 土樣）=（A540+0.002）÷ 2.5554×V 反總×10³÷ W÷T÷ 150

= 75.14×（A540+0.002）÷ W

V 反總：反應總體積，0.6ml；T：反應時間，1/48d；1000：1mmol/L =10³μmol/L；150：木糖分子量。

注意事項：

1. 保證震蕩反應 30min，使酶與底物充分接觸。

2. 注意 90℃水浴防止爆開，以免改變反應體系。