1. 蛋白身份檔案

• 命名：Triggering Receptor Expressed on Myeloid cells-2

• 基因坐標(biāo)：人類 6p21.1，小鼠 17 B3；單拷貝，無(wú)假基因干擾

• 分子量：全長(zhǎng) 35 kDa，去糖基化后 26 kDa；N-糖基化位點(diǎn) 4 個(gè)，O-糖基化 1 個(gè)，決定其在 WB 上常跑出 45–55 kDa 的“胖條帶"

• 剪切變體：主要兩條，TREM2-S1（含胞內(nèi)域）與 TREM2-S2（可溶型，缺失跨膜段）。阿爾茨海默病腦脊液里可溶型濃度升高 2–4 倍，成為液體活檢熱點(diǎn)

2. 結(jié)構(gòu)域全景圖

Signal peptide | Ig-like V-set | Stalk | TM | Lys-Lys short tail1-18          19-132         133-157 158-178 179-180

• Ig-like V-set：由 9 條 β-strand 構(gòu)成三明治骨架，疏水核心夾角 42°，提供配體口袋

• ** stalk 區(qū)**：兩段 heptad repeat，賦予 30 ? 柔性，讓 V-set 域在細(xì)胞表面“探頭"距離可達(dá) 5 nm，方便與高密度脂蛋白或 Aβ 寡聚體同時(shí)結(jié)合

• 跨膜段：帶正電 Lys 殘基與 DAP12 的 Asp 形成鹽橋，1:2 化學(xué)計(jì)量鎖定信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)

3. 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)“三步走"

1. 配體交聯(lián)：TREM2 自身寡聚化 <10 ms，DAP12 ITAM 酪氨酸被 Src 家族 Lyn 磷酸化

2. PI3K 招募：p85 亞基 SH2 結(jié)構(gòu)域識(shí)別 p-ITAM，PIP2→PIP3 轉(zhuǎn)換率提升 6 倍

3. 下游分叉：

• mTOR-S6K 軸驅(qū)動(dòng)糖酵解重編程，巨噬細(xì)胞在 15 min 內(nèi)完成 Warburg 效應(yīng)切換

• RhoA-ROCK 抑制 cofilin 磷酸化，促進(jìn)肌動(dòng)蛋白杯狀結(jié)構(gòu)，吞噬效率提升 40%

4. 病理場(chǎng)景里的“兩把劍"

• 阿爾茨海默病：R47H 突變使 V-set 域靜電勢(shì)由 ?3.2 降至 ?1.8 kT/e，Aβ 親和力下降 70%，小膠質(zhì)細(xì)胞無(wú)法形成聚集體吞噬冠，斑塊周圍形成“屏障"，軸突退行性變加速

• 腫瘤微環(huán)境：TAM 表面 TREM2 表達(dá)量與 PD-L1 共線性升高（r=0.81）。抗 TREM2 單抗與 anti-PD-1 聯(lián)用，小鼠 MC38 模型中 CD8/Treg 比例由 1.2 提升至 4.7，腫瘤生長(zhǎng)抑制率 82%

• 脂肪肝：高膽固醇誘導(dǎo)肝細(xì)胞釋放 soluble TREM2，通過(guò)配體陷阱機(jī)制阻斷 Kupffer 細(xì)胞吞噬，脂質(zhì)沉積增加 35%，血清 ALT 升高 2 倍

5. 實(shí)驗(yàn)選型與驗(yàn)證套路

• 流式抗體：選克隆 237920，表位在 50–65 aa，不受糖基化遮蔽，人鼠交叉反應(yīng)

• WB 內(nèi)參：去糖基化前先用 PNGase F 37 °C 處理 1 h，否則 55 kDa 主條帶會(huì)被誤判為雜帶

• 原位雜交：RNAscope 探針 targeting 300–800 nt，避開(kāi) Alu 重復(fù)區(qū)，背景干凈

• 基因敲除：CRISPR 靶向 exon 2，刪除 104 bp，造成移碼，Western 驗(yàn)證零蛋白條帶

6. 科研與工業(yè)級(jí)原料采購(gòu)清單

采購(gòu)提醒：若用于 BLI 親和力測(cè)試，優(yōu)先選無(wú)標(biāo)簽或 Avi 單標(biāo)，避免 Fc 介導(dǎo)的二價(jià)結(jié)合造成 KD 虛低

7. 常見(jiàn)問(wèn)題排查表

• Western 多帶：糖基化異構(gòu)體，加 PNGase F 后仍出現(xiàn) 30 kDa 條帶，考慮金屬蛋白酶切割，加 EDTA 可抑制

• ELISA 背景高：血清樣本含可溶性 TREM2，稀釋度需 ≥1:100；用阻斷肽預(yù)吸附抗體可降低 50% 信號(hào)

• 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)無(wú)響應(yīng)：配體需寡聚化，單體 Aβ1-42 無(wú)效，預(yù)孵育 37 °C 24 h 形成寡聚體后刺激

8. 未來(lái) 18 個(gè)月可落地的熱點(diǎn)

• PROTAC 降解劑：設(shè)計(jì)招募 VHL 的配體，DC50 目標(biāo) <100 nM，先導(dǎo)體外 PoC 已出

• 雙抗平臺(tái)：同時(shí)靶向 TREM2 與 CD47，阻斷“別吃我"信號(hào)，提升巨噬細(xì)胞吞噬選擇性

• 外泌體裝載：將 TREM2 mRNA 包被在 CD68 靶向外泌體，靜脈給藥穿越血腦屏障效率提升 3 倍，預(yù)計(jì) 2026 Q2 進(jìn)入 I 期