一、 實驗背景

在植物抗病基因工程研究中，常利用農桿菌瞬時表達系統在本氏煙草（Nicotiana benthamiana）中進行蛋白互作驗證。例如，將誘餌蛋白（Bait）標記為 GFP（綠色），獵物蛋白（Prey）標記為 RFP/mCherry（紅色）。實驗的核心難點在于：如何在侵染 2-3 天后，快速確認哪些葉片區域發生了共表達，以便精準取樣進行 Co-IP（免疫共沉淀）或 BiFC（雙分子熒光互補）實驗。

二、 傳統方法的局限性

以往，研究員需剪下葉片，在熒光顯微鏡下切換濾光片，逐一比對 GFP 和 RFP 信號是否重疊。這種方法存在明顯弊端：

1. 破壞性采樣：一旦制片觀察，該葉片便無法用于后續的蛋白提取或表型觀察。

   
   

2. 效率低下：面對幾十上百個樣本，顯微鏡下的逐個篩選耗時費力。

   
   

3. 定位偏差：離體后的葉片狀態與活體存在差異，可能導致蛋白定位信息失真。

   
   

三、 LUYOR 活體雙色篩查方案

針對雙標實驗，上海儀橙提供的 LUYOR-3415RG 雙波長熒光蛋白激發光源 提供了的解決方案。

• 設備配置：LUYOR-3415RG 集成了 R 模塊（藍光） 激發 GFP 和 G 模塊（綠光） 激發 RFP，配合 LUV-30A（黃鏡） 和 LUV-50A（紅鏡） 眼鏡，實現雙通道獨立觀察。

  
  

• 操作流程：

  
  

1. 農桿菌注射后培養 48-72 小時。

   
   

2. 研究員手持 LUYOR-3415RG，先切換至藍光模式，佩戴 LUV-30A 眼鏡，快速掃描葉片，標記發出綠色熒光的區域。

   
   

3. 隨即切換至綠光模式，佩戴 LUV-50A 眼鏡，觀察同一區域是否發出紅色熒光。

   
   

4. 若同一區域紅綠雙顯，即為共表達陽性區域。

   
   

• 輔助解剖：確認陽性區域后，無需摘葉，直接用手術刀切取該特定部位（避開葉脈等大組織），立即投入液氮保存。

  
  

四、 核心價值

該方案實現了“活體確認—精準取樣"的閉環。相比傳統顯微鏡，LUYOR 便攜式系統不僅將篩選效率提升了 5 倍以上，更重要的是保留了樣本的完整性，確保了下游蛋白實驗的準確性。無論是用于科研論文的數據支撐，還是用于轉基因育種的早期篩選。

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