牛病毒性腹瀉病毒抗體(p80)競爭ELISA檢測試劑盒說明書
產品名稱
中文名稱:牛病毒性腹瀉病毒抗體(p80)競爭 ELISA 檢測試劑盒
英文名稱:Bovine Viral Diarrhea virus (p80) Competitive ELISA antibody test kit
作用與用途
通過檢測牛血清樣品中的牛病毒性腹瀉病毒抗體水平。
試劑盒組成
組成成份 | 1*96T | 2*96T | 5*96T |
抗原包被板 | 1 塊(96 孔/塊) | 2 塊(96 孔/塊) | 5 塊(96 孔/塊) |
酶標抗體 | 1 瓶(15ml/瓶) | 1 瓶(30ml/瓶) | 1 瓶(60ml/瓶) |
20X 洗滌液 | 1 瓶(30ml/瓶) | 1 瓶(60ml/瓶) | 2 瓶(60ml/瓶) |
陽性對照 | 1 管(0. 1ml/管) | 1 管(0.2ml/管) | 1 管(0.5ml/管) |
陰性對照 | 1 管(0. 1ml/管) | 1 管(0.2ml/管) | 1 管(0.5ml/管) |
底物 A 液 | 1 瓶(8ml/瓶) | 1 瓶(15ml/瓶) | 1 瓶(30ml/瓶) |
底物 B 液 | 1 瓶(8ml/瓶) | 1 瓶(15ml/瓶) | 1 瓶(30ml/瓶) |
終止液 | 1 瓶(8ml/瓶) | 1 瓶(15ml/瓶) | 1 瓶(30ml/瓶) |
說明書 | 1 份 | 1 份 | 1 份 |
板貼 | 3 張 | 6 張 | 15 張 |
操作步驟與判定
1.操作步驟
1. 1 試劑準備:20X 洗滌液需用蒸餾水或去離子水稀釋成 1X 洗滌液(即 1 份 20X 洗滌液加入 19 份蒸餾水)。
1.2 實驗準備:取出包被板,記錄好樣本的位置。如需使用部分板條,則將需要的板條拆下進行實驗,將剩余的板條置于 2-8℃干
燥保存。
1.3 加樣/對照:分別將 20µl 待檢樣品和陰、陽性對照加入到抗原包被板孔內,其中陰、陽性對照各加 2 孔;注意每個樣品使用不 同的吸頭。
1.4 加酶:每孔加入 80ul 酶標抗體 ,輕輕振蕩混勻 ,封板后置于 37℃溫育 30 分鐘。
1.5 洗滌:棄去孔內液體 ,每孔加入 300µl 1X 洗滌液 ,洗滌 4 次 ,在最后一次 1X 洗滌液棄去后 ,將孔中殘留的 1X 洗滌液拍干。
1.6 顯色:每孔先加入 50µl 底物 A 液 ,再加入 50µl 底物 B 液 ,輕輕振蕩混勻 ,封板后置于 37℃溫育 15 分鐘。
1.7 終止:每孔加入 50µl 終止液 ,輕輕振蕩混勻 ,測定 OD450nm波長處各孔的吸光值。
2.判定
2. 1 實驗成立條件 :陰性對照 OD450nm 平均值-陽性對照 OD450nm 平均值≥0.3。
如果實驗結果不成立 ,有可能是實驗操作失誤造成的 ,應按操作步驟進行重復實驗。
2.2 S/N 值= 陰性對照 OD450nm 均值
2.3 結果判定 :S/N 值≥0.3 ,判為陰性; S/N 值<0.3 ,判為陽性。
3.注意事項
3. 1 試劑盒嚴禁凍結 ,試劑盒從 2-8℃冰箱中取出后需室溫放置 30 分鐘以上 ,完quan恢復至室溫方可使用 ,使用后應立即密封放置
2-8℃保存。
3.2 使用前需確認試劑盒有效期 ,應在有效期內使用。
3.3 所有試劑嚴禁接觸皮膚和粘膜 ,檢測結束后所用耗材按國家規定進行無害化處理。
3.4 底物 B 溶液變藍,則不能使用。
3.5 每個血清樣品 1 個吸頭 ,避免交叉污染。
3.6 待檢血清樣品數量較多時 ,應盡量縮短加樣時間。
3.7 終止反應后立即用酶標儀讀數,應在 10 分鐘內完成。
3.8 所有樣品、洗滌液和各種廢棄物都應滅活處理。
3.9 嚴格按照實驗操作步驟操作。
3. 10 僅用于科研或遵守當地法律法規。
規格
1*96T/盒 ,2*96T/盒 ,5*96T/盒
貯藏條件及有效期
2~8℃保存 ,有效期為 12 個月。
僅供科研使用
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