雞傳染性貧血病毒ELISA 抗體檢測試劑盒使用說明書

 【名  稱】

通  用  名:  雞傳染性貧血病毒 ELISA 抗體檢測試劑盒

英  文 名:  Chicken  Anemia Virus ELISA Antibody Kit    

漢語拼音:  Jichuanranxingpinxuebingdu ELISA Kangtijiance Shijihe

【主要組分與含量】

                                   【作用與用途】  適用于檢測雞血清中傳染性貧血病毒抗體。

【注意事項】

（1）實驗前，將試劑盒所有組分取出置室溫 回溫至少30 分鐘，實驗完成后放回2～8℃保存。

（2）若試劑盒陰陽性對照、酶標記物出現(xiàn)少量懸浮物，屬正常現(xiàn)象。

（3）請在試劑盒規(guī)定的有效期內(nèi)使用；禁止非同批試劑盒混用。

（4）沒有用完的抗原包被板應(yīng)貯存在密封塑料袋內(nèi)，于 2～8℃存放。

（5）避免底物顯色液暴露于強光，避免接觸氧化劑。

（6）先使用血清稀釋板稀釋完所有的待檢血清，再將稀釋好的血清轉(zhuǎn)移到抗原包被板上， 使反應(yīng)時間一致。

（7）濃縮洗滌液用蒸餾水或去純水稀釋，如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶加熱使其溶解后再使用。

（8）嚴格按照操作程序，仔細的吸液、計時，充分洗滌，對于獲得精確的結(jié)果是非常必 要的。

（9）用過的材料要無害化處理，處理時遵照當?shù)亍^(qū)域以及國家法規(guī)。

【用法與判定】

1    用法

1. 1    樣品準備  取動物全血，待血液凝固后， 以 4000r/min 離心 10 分鐘，收集血清； 或待血液凝固后自然析出血清，再收集血清。血清應(yīng)清亮，無溶血。

1.2    洗滌液配制  使用前，將 20 倍濃縮洗滌液用蒸餾水或純水作 20 倍稀釋（例如： 10mL 的濃縮洗滌液加上 190mL 純水），混勻。置 2～8℃保存，可保存 7 日。

1.3    待檢血清和對照的稀釋

1.3. 1  待檢血清的稀釋  將待檢血清在血清稀釋板中按 1:50 稀釋（例如：196μL 樣品稀 釋液中加 4μL 待檢血清）。

1.3.2    對照的稀釋  陽性和陰性對照無需稀釋。

1.4    操作步驟

1.4. 1    取抗原包被板（根據(jù)樣品多少，可拆開分次使用），每孔加入稀釋好的洗滌液 300μL ，無需靜置，甩掉板孔中的洗滌液，重復(fù)洗滌共計 2 次，最后一次在吸水材料上拍干。

1.4.2    在抗原包被板孔中加入 90μL 樣品稀釋液，再加入經(jīng) 50 倍稀釋好的待檢血清樣品 10μL ，陽性和陰性對照血清直接取 100µL 加入到抗原包被板孔中，

待檢血清各設(shè) 1 孔，陰性 對照、陽性對照各設(shè) 2 孔，輕輕搖勻孔中樣品（勿溢出），置 37℃溫育 30 分鐘。

1.4.3    甩掉板孔中的液體，每孔加入稀釋好的洗滌液 300µL ，無需靜置，甩掉板孔中的 洗滌液，重復(fù)洗滌共計 5 次，最后一次在吸水材料上拍干。

1.4.4    每孔加入酶標記物 100μL ，置 37℃溫育 30 分鐘。

1.4.5    洗滌 5 次，方法同 1.4.3。

1.4.6    每孔加入底物顯色液 100µL ，置室溫（20~25℃) 避光顯色 10 分鐘。

1.4.7    每孔加入終止液   50µL ，10 分鐘內(nèi)在酶標儀上測定各孔 OD450nm 值。

2    判定

2. 1    成立條件  陽性對照 OD450nm 平均值＞0.6 ，陰性對照 OD450nm 平均值＜0.4。

        2.2    判定標準  S 為樣品 OD450nm 值，P 為陽性對照 OD450nm 平均值，計算樣品 S/P 值。

  如果 S/P 值≥0.5 ，判為雞傳染性貧血病毒抗體陽性；

  如果 S/P 值＜0.5 ，判為雞傳染性貧血病毒抗體陰性。

    【規(guī)格】 96 孔/盒或192 孔/盒或480 孔/盒

【貯藏與有效期】  2~8℃保存，有效期為 12 個月 

溫馨提示：抗原包被板真空包裝袋若有漏氣，抗原包被板仍然正常有效， 不影響實驗結(jié)果，請放心使用。

僅供科研使用