鏈霉親和素磁珠

MCE 國際站：Streptavidin Magnetic Beads

品牌：MedChemExpress (MCE)

貨號：HY-K0208

中文名稱：鏈霉親和素磁珠

存儲條件：4°C，2年請勿離心、干燥或冷凍磁珠。

產品活性：MCE 鏈霉親和素磁珠用于生物素化核酸、生物素化抗體或其他生物素化配體和靶分子的分離和檢測。

生物活性：MCE 鏈霉親和素磁珠使用納米表面生物技術將重組中性鏈霉親和素共價偶聯到超順磁性磁珠微球表面，形成單分子固定層，可用于生物素化核酸、生物素化抗體或其他生物素化配體和靶分子的分離和檢測。由于具有單層的鏈霉親和素，其表面的絕大多數生物素結合位點在空間上不僅可以結合游離生物素，而且還可以結合生物素化的配體/靶標，使用簡單有效。 1. 載量高 2. 非特異性低/p> 3. 樣品損失少 4. 即開即用

描述及優勢：

MCE 鏈霉親和素磁珠使用納米表面生物技術將重組中性鏈霉親和素共價偶聯到超順磁性磁珠微球表面，形成單分子固定層，可用于生物素化核酸、生物素化抗體或其他生物素化配體和靶分子的分離和檢測。由于具有單層的鏈霉親和素，其表面的絕大多數生物素結合位點在空間上不僅可以結合游離生物素，而且還可以結合生物素化的配體/靶標，使用簡單有效。

1. 載量高

2. 非特異性低

3. 樣品損失少

4. 即開即用

操作流程：1. 固定化核酸 1) 將磁珠充分混懸，可置于混合器上渦旋振蕩 20 秒，取 100 μL 磁珠到新的 1.5 mL EP 管中，置于磁力架，磁性分離，棄上清液。注：用戶可根據生物素化分子的使用量，參考磁珠的載量，計算需取用的磁珠體積，建議生物素化分子的加入量為磁珠載量的 1-2 倍，使磁珠結合飽和。2) 加入1 mL Wash Buffer I，充分洗滌磁珠。磁珠洗滌過程：加入對應的buffer到EP 管中，蓋上管蓋，渦旋振蕩磁珠15秒，磁性分離，棄上清。重復以上步驟1次。3) 加入 500 μL 用 Wash Buffer I 稀釋的生物素化核酸(使磁珠濃度為 2 mg/mL)，充分振蕩混懸，置于旋轉混合儀上孵育(室溫, 30 分鐘；4°C, 2 小時)。4) 磁性分離，將上清液移至新的 EP 管中，以備后續使用。5) 加入1 mL Wash Buffer I，充分洗滌磁珠。磁珠洗滌過程：加入對應的buffer到EP 管中，蓋上管蓋，渦旋振蕩磁珠15秒，磁性分離，棄上清。重復以上步驟1次。注：可通過測定反應前后核酸的濃度，計算結合到磁珠上的核酸量。2. 固定化抗體/蛋白 1) 將磁珠充分混懸，可置于混合器上渦旋振蕩 20 秒，取 100 μL 磁珠到新的 1.5 mL EP 管中，置于磁力架，磁性分離，棄上清液。注：用戶可根據生物素化分子的使用量，參考磁珠的載量，計算需取用的磁珠體積，建議生物素化分子的加入量為磁珠載量的 1-2 倍，使磁珠結合飽和。2) 加入1 mL Wash Buffer II，充分洗滌磁珠。磁珠洗滌過程：加入對應的buffer到EP 管中，蓋上管蓋，渦旋振蕩磁珠15秒，磁性分離，棄上清。重復以上步驟1次。3) 加入 1 mL 用 Wash Buffer II 稀釋的生物素化抗體/蛋白(使磁珠濃度為1 mg/mL)，充分振蕩混懸，置于旋轉混合儀上旋轉孵育(室溫, 60 分鐘；4°C, 4 小時)。4) 磁性分離，將上清液移至新的 EP 管中，以備后續使用。5) 加入1 mL Wash Buffer II，充分洗滌磁珠。磁珠洗滌過程：加入對應的buffer到EP 管中，蓋上管蓋，渦旋振蕩磁珠15秒，磁性分離，棄上清。重復以上步驟4次。3. 洗脫 3.1 生物素標記核酸的洗脫步驟：向磁珠中加入 50-100 μL Elution BufferⅠ，65°C 孵育 5 分鐘或 90°C 孵育 2 分鐘，置于磁力架，磁性分離，收集上清。3.2 生物素標記抗體/蛋白的洗脫a 變性洗脫法：此方法洗脫的樣品適用于 SDS–PAGE 檢測。步驟：向磁珠中加入 50–100 μL 1 × SDS-PAGE Loading Buffer 混合均勻， 95°C 加熱 5 分鐘。置于磁力架，分離磁珠，收集上清，進行 SDS-PAGE 檢測。注：如果選擇變性洗脫，那么洗脫液將包含鏈霉親和素單體和聚體、生物素標記抗體或蛋白。b 非變性洗脫法：此方法洗脫的樣品保持原有的生物活性，可用于后期功能分析。步驟：向磁珠中 50–100 μL Elution Buffer Ⅱ，室溫孵育 5–10 分鐘。置于磁力架，分離磁珠，收集上清至新的 EP 管，并立即滴入總體積 1/10 體積的中和緩沖液 (0.1 M NaOH)，將洗脫產物 pH 調節至中性，樣品用于后期功能分析。注：注：如果選擇非變性洗脫，酸性條件下鏈霉親和素可能會脫落，需注意孵育時間不要超過 10 分鐘；酸性洗脫液能破壞大部分的抗體與抗原的相互作用，但為了更好的洗脫效果，可預先用 1 mL 0.1% Tween-20 的水溶液洗滌磁珠 1 次。

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