Annexin V-FITC/PI 細胞凋亡檢測試劑盒
MCE 國際站:Annexin V-FITC/PI Apoptosis Detection Kit
品牌:MedChemExpress (MCE)
貨號:HY-K1073
中文名稱:Annexin V-FITC/PI 細胞凋亡檢測試劑盒
存儲條件:-20°C,1年避光保存,避免反復凍融
產品活性:MCE Annexin V-FITC/PI 細胞凋亡檢測試劑盒可方便、快捷的檢測細胞凋亡。經 Annexin V-FITC 和 PI 聯合染色后,正常細胞基本無熒光(Annexin V-/PI-),早期凋亡細胞呈綠色熒光(Annexin V+/PI-),晚期凋亡細胞及壞死細胞則呈綠色和紅色熒光(Annexin V+/PI+)。
生物活性:MCE Annexin V-FITC/PI 細胞凋亡檢測試劑盒采用 FITC 標記的重組人Annexin V 檢測細胞凋亡。在正常細胞中,磷脂酰絲氨酸 (PS) 位于細胞膜內側;細胞凋亡早期, PS 會外翻到細胞膜外側。 Annexin V (膜聯蛋白 V)是一種 Ca2+ 依賴性磷脂結合蛋白,可與 PS 特異性結合,因此Annexin V 常作為檢測細胞早期凋亡的靈敏指標之一。Annexin V 經 FITC 標記后可發綠色熒光,利用熒光顯微鏡或流式細胞儀可檢測細胞凋亡的發生。此外,本試劑盒中的碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)染色液是一種不能穿透細胞膜的紅色熒光染料,可對凋亡晚期細胞及壞死細胞染色。經 Annexin V-FITC 和 PI 聯合染色后,正常細胞基本無熒光(Annexin V-/PI-)早期凋亡細胞呈綠色熒光(Annexin V+/PI-),晚期凋亡細胞及壞死細胞則呈綠色和紅色熒光(Annexin V+/PI+)。
描述及優勢:
MCE Annexin V-FITC/PI 細胞凋亡檢測試劑盒采用 FITC 標記的重組人Annexin V 檢測細胞凋亡。在正常細胞中,磷脂酰絲氨酸 (PS) 位于細胞膜內側;細胞凋亡早期, PS 會外翻到細胞膜外側。 Annexin V (膜聯蛋白 V)是一種 Ca2+ 依賴性磷脂結合蛋白,可與 PS 特異性結合,因此Annexin V 常作為檢測細胞早期凋亡的靈敏指標之一。Annexin V 經 FITC 標記后可發綠色熒光,利用熒光顯微鏡或流式細胞儀可檢測細胞凋亡的發生。此外,本試劑盒中的碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)染色液是一種不能穿透細胞膜的紅色熒光染料,可對凋亡晚期細胞及壞死細胞染色。經 Annexin V-FITC 和 PI 聯合染色后,正常細胞基本無熒光(Annexin V-/PI-)早期凋亡細胞呈綠色熒光(Annexin V+/PI-),晚期凋亡細胞及壞死細胞則呈綠色和紅色熒光(Annexin V+/PI+)。
操作流程:細胞與 Annexin V-FITC 和 PI 孵育 1. 收集細胞:收集 1-5 × 105 個細胞。 懸浮細胞:1000 g 離心 5 min,棄去上清。加入 1 mL 預冷的 PBS 輕輕重懸細胞沉淀,1000 g 離心 5 min,棄去上清,保留細胞沉淀。 貼壁細胞:小心吸取細胞培養液保存備用。加入 PBS 洗滌后,加入適量胰酶消化液(盡量不含 EDTA,以免影響 Annexin V 和 PS 的結合)消化細胞。加入前面收集的培養液,輕輕吹打細胞,制成單細胞懸液,1000 g 離心 5 min,棄去上清。加入 1 mL 預冷的 PBS 輕輕重懸細胞沉淀,1000 g 離心 5 min,棄去上清,保留細胞沉淀。 注:建議胰酶消化液不含 EDTA。 2. 加入 195 μL Binding Buffer,輕輕重懸細胞。 3. 加入 5 μL Annexin V-FITC,輕輕混勻。 4. 加入 10 μL PI Stain,輕輕混勻。 5. 室溫下避光孵育 10-20 min。 注:孵育過程中可輕輕顛倒數次以加強染色效果。 6. 檢測與分析 6.1 流式細胞儀檢測:用流式細胞儀檢測熒光強度。 注: a. 流式檢測時,Annexin V-FITC 最大激發波長為 488 nm,最大發射波長為 525 nm,在 FL1 通道檢測;PI-DNA 最大激發波長為 535 nm,最大發射波長為 617 nm,在 FL2 或FL3 通道檢測。 b. 建議設置三組對照:未染色組、PI 單染組及 Annexin V-FITC 單染組。 6.2 熒光顯微鏡檢測:1000 g 離心 5 min,棄去上清,加入 50-100 μL Binding Buffer 輕輕重懸細胞沉淀,涂片后用熒光顯微鏡檢測熒光強度。
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品牌介紹:
MedChemExpress (MCE) 是生命科學試劑供應商,致力于為生命科學研究與藥物發現提供創新解決方案。我們提供包括抑制劑、化合物庫、重組蛋白、抗體、多肽和一站式AI藥物篩選等在內的全品類、高品質活性分子和技術服務,是科研領域值得信賴的合作伙伴。MCE 總部位于美國新澤西州,并在全球范圍內建立了多個研發、生產和物流中心。
全面的產品矩陣:
MedChemExpress 擁有超過 200,000 種以上的生物活性分子,覆蓋廣泛的信號通路與研究領域,包括靶點與疾病機制研究;檢測、分析與質控;疾病建模與藥物篩選;干細胞研究與細胞治療;基因治療以及其他藥物發現領域。 ● 靶點與疾病機制研究:抑制劑與激動劑、PROTAC、ADC、重組蛋白、抗體抑制劑、多肽、誘導疾病模型產品、動物飼料產品 ● 檢測、分析與質控:同位素標記化合物、熒光染料、參考標準品、抗體、酶、試劑盒 ● 干細胞研究與細胞治療:GMP 小分子、類器官相關蛋白、Matrigel、培養基、血清 ● 基因治療:小RNA、脂質體、佐劑、限制性內切酶、PCR、qPCR 試劑盒
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