產品概述
由艾美捷Bethyl Laboratories推出的HCF1抗體(貨號A301-399A)是一種兔源多克隆抗體,特異性靶向人源宿主細胞因子1(Host Cell Factor 1,HCF1)。該抗體以全IgG形式提供,濃度為200 µg/ml,經抗原親和純化,未偶聯標記物,適用于免疫沉淀(IP)和Western Blot(WB)檢測。
免疫原與特異性
本抗體的免疫原對應人源HCF1蛋白第1700至1750位氨基酸殘基之間的區域,參考序列號為NP_005325.2(GeneID 3054)。通過表位特異性親和純化工藝,將針對HCF1固定化表位的抗體從抗血清中分離純化,確保高特異性識別目標抗原。
技術參數
參數 | 詳細信息
靶標 | HCF1 (Host cell factor 1)
反應性 | 人
應用 | 免疫沉淀(IP)、Western Blot(WB)
宿主 | 兔
克隆性 | 多克隆
形式 | 全IgG
免疫原 | 第1700–1750位氨基酸區間
同型 | IgG
偶聯物 | 未偶聯
純度 | 抗原親和純化
抗原種屬 | 人
濃度 | 200 µg/ml
儲存條件 | 2–8 °C
保質期 | 收貨后1年
緩沖液 | Tris緩沖鹽水,含0.1% BSA及0.09%疊d化鈉
濃度測定方法
免疫球蛋白濃度采用比爾定律測定,其中1 mg/ml IgG在280 nm波長下的吸光度(A280)為1.4。
Western Blot實驗方案
推薦稀釋度
1:2,000 – 1:10,000
實驗條件
封閉及稀釋液:5%脫脂牛奶-TBST
一抗孵育:過夜孵育(4°C)
二抗(細胞裂解液WB):山羊抗兔IgG重鏈和輕鏈抗體(貨號A120-101P)
二抗(免疫沉淀物WB):使用抗兔IgG輕鏈HRP偶聯抗體,并在封閉緩沖液中加入5%正常豬血清(貨號S100-020),以消除膜上IgG重鏈的干擾信號。
免疫沉淀實驗方案
推薦用量:6 µg抗體/mg細胞裂解物
靶點背景信息
蛋白功能
HCF1最初被發現是單純皰疹病毒(HSV)利用的一種宿主細胞因子,用于促進病毒立即早期基因的轉錄。在正常細胞中,HCF1作為轉錄共調節因子發揮核心作用,參與組蛋白修飾和細胞周期進程調控。
HCF1是多種轉錄因子復合物的組成成分,例如與OCT1(POU2F1)和GABP等協同作用。通過其N端的β-propeller結構域和C端的纖維蛋白原相關結構域,HCF1能夠募集組蛋白甲基轉移酶(如SET1/COMPASS復合物)和組蛋白乙酰轉移酶,從而表觀遺傳調控基因表達。此外,HCF1在細胞周期G1/S轉變過程中發生蛋白酶體介導的加工,產生多肽片段,這些片段仍保留功能并參與調控細胞增殖。
別稱
C1 factor、CFF、HCF、HCF1、HCF-1、HFC1、host cell factor 1、MRX3、PPP1R89(protein phosphatase 1, regulatory subunit 89)、VCAF、VP16 accessory protein、VP16-accessory protein
產品優勢與功能特點
1. 雙重應用驗證:同時適用于免疫沉淀和Western Blot檢測,WB稀釋范圍寬廣(1:2,000–1:10,000),IP推薦用量明確(6 µg/mg裂解物),便于研究者直接使用,減少預實驗工作量。
2. 高特異性親和純化:采用針對HCF1第1700–1750位表位的固相親和純化,有效去除非特異性血清蛋白和干擾抗體,降低背景信號,提高檢測信噪比,尤其適用于內源性HCF1的IP-WB聯用。
3. 穩定儲存配方:緩沖液含0.1% BSA作為載體蛋白,防止抗體在低濃度下吸附損失;0.09%疊d化鈉作為防腐劑;Tris緩沖鹽水維持生理性pH和離子強度。2–8°C下可穩定保存1年,無需冷凍,避免反復凍融導致的活性下降。
4. 精準定量:基于比爾定律(A280=1.4對應1 mg/ml IgG)進行濃度測定,確保不同批次間抗體濃度的一致性,提升實驗結果的可重復性。
5. IP-WB聯用優化設計:本抗體配套提供針對免疫沉淀后Western Blot的二抗選擇建議——使用抗兔IgG輕鏈HRP抗體并添加5%正常豬血清封閉,可有效避免IP洗脫液中IgG重鏈(約55 kDa)對目標蛋白檢測信號的遮擋,尤其當HCF1分子量較大(約210 kDa)時,重鏈干擾雖不明顯,但輕鏈專用二抗仍能提升條帶清晰度。
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