產品概述

由艾美捷Bethyl Laboratories推出的ARA70抗體（貨號A302-272A）是一種兔源多克隆抗體，特異性靶向人源雄激素受體相關蛋白70（Androgen Receptor-Associated Protein 70，ARA70），即核受體共激活因子4（NCOA4）。該抗體以全IgG形式提供，濃度為1000 µg/ml，經抗原親和純化，未偶聯標記物，適用于免疫沉淀（IP）和Western Blot（WB）檢測。

免疫原與特異性

本抗體的免疫原對應人源ARA70蛋白第564至614位氨基酸殘基之間的區域（接近C末端），參考序列號為NP_005428.1（GeneID 8031）。通過表位特異性親和純化工藝，將針對ARA70固定化表位的抗體從抗血清中分離純化，確保高特異性識別目標抗原。

技術參數

參數 | 詳細信息

靶標 | ARA70 (NCOA4，核受體共激活因子4)

反應性 | 人

應用 | 免疫沉淀（IP）、Western Blot（WB）

宿主 | 兔

克隆性 | 多克隆

形式 | 全IgG

免疫原 | 第564位–C末端之間（具體為564-614位）

同型 | IgG

偶聯物 | 未偶聯

純度 | 抗原親和純化

抗原種屬 | 人

濃度 | 1000 µg/ml

儲存條件 | 2–8 °C

保質期 | 收貨后1年

緩沖液 | Tris-檸檬酸/磷酸緩沖液，pH 7–8，含0.09%疊d化鈉

濃度測定方法

免疫球蛋白濃度采用比爾定律測定，其中1 mg/ml IgG在280 nm波長下的吸光度（A280）為1.4。

Western Blot實驗方案

推薦稀釋度

1:2,000 – 1:10,000

實驗條件

封閉及稀釋液：5%脫脂牛奶-TBST

一抗孵育：過夜孵育（4°C）

二抗（細胞裂解液WB）：山羊抗兔IgG重鏈和輕鏈抗體（貨號A120-101P）

二抗（免疫沉淀物WB）：使用抗兔IgG輕鏈HRP偶聯抗體，并在封閉緩沖液中加入5%正常豬血清（貨號S100-020），以消除膜上IgG重鏈的干擾信號。

免疫沉淀實驗方案

推薦用量：6 µg抗體/mg細胞裂解物

靶點背景信息

蛋白功能

ARA70最初是在RET原癌基因的染色體易位中作為融合伙伴被發現的。隨后，在酵母雙雜交篩選中被鑒定為雄激素受體（AR）的配體依賴性相關因子。除作為AR的共激活因子外，ARA70還被發現能夠作為維生素D受體、雌激素受體、PPARα和PPARγ的共激活因子，參與多種核受體信號通路的調控。

ARA70（NCOA4）在細胞中主要參與以下過程：

核受體轉錄激活：通過與核受體的配體結合域相互作用，增強受體介導的基因轉錄。

鐵代謝調控：ARA70被確認為鐵蛋白自噬（ferritinophagy）的關鍵調節因子，介導鐵蛋白（ferritin）的選擇性自噬降解，釋放細胞內儲存的鐵離子，維持鐵穩態。

DNA損傷修復：近年來研究發現ARA70參與同源重組修復過程。

別稱

70 kDa androgen receptor coactivator、70 kDa AR-activator、Androgen receptor coactivator 70 kDa protein、androgen receptor-associated protein of 70 kDa、ARA70、ELE1、NCoA-4、nuclear receptor coactivator 4、PTC3、ret fused、RET-activating gene ELE1、Ret-activating protein ELE1、RFG

產品優勢與功能特點

1. 高濃度配方（1000 µg/ml）：相比同類產品（通常200 µg/ml），本抗體提供更高的母液濃度，靈活性更強。寬WB稀釋范圍（1:2,000–1:10,000）允許用戶根據目標蛋白豐度進行調節，特別是在檢測低表達水平的ARA70時，可降低稀釋倍數而不犧牲抗體用量。

2. 雙重應用驗證：同時適用于免疫沉淀和Western Blot檢測，IP推薦用量明確（6 µg/mg裂解物），用戶無需自行摸索，可快速建立實驗體系。

3. 高特異性親和純化：采用針對ARA70第564–614位表位的固相親和純化，有效去除非特異性血清成分，降低背景信號，尤其適用于IP富集后的WB檢測，提高信噪比。

4. 穩定儲存配方：Tris-檸檬酸/磷酸緩沖液（pH 7–8）維持穩定的酸堿環境，0.09%疊d化鈉作為防腐劑。2–8°C下可穩定保存1年，無需冷凍，避免反復凍融導致的抗體聚集和活性下降。

5. IP-WB聯用優化設計：本抗體配套提供針對免疫沉淀后Western Blot的二抗選擇建議——使用抗兔IgG輕鏈HRP抗體并添加5%正常豬血清封閉。ARA70分子量約為70 kDa，在IP洗脫液中IgG重鏈（約55 kDa）可能產生干擾信號，輕鏈特異性二抗可有效消除這一問題，確保目標條帶清晰可辨。