冠宇儀器玉米赤霉烯酮快速檢測卡檢測原理：競爭抑制免疫層析技術(shù)

玉米赤霉烯酮快速檢測卡采用競爭抑制免疫層析原理，基于特異性抗體-抗原反應(yīng)實(shí)現(xiàn)樣本中ZEN的定性篩查。檢測時，樣本溶液中ZEN與金標(biāo)微孔中的膠體金標(biāo)記抗體結(jié)合，若樣本中ZEN濃度高于檢測限，游離ZEN將競爭結(jié)合抗體位點(diǎn)，阻止抗體隨液體層析至檢測線（T線）被固定化抗原捕獲，從而影響T線顯色強(qiáng)度，通過肉眼或讀卡儀判讀結(jié)果。

操作前準(zhǔn)備：試劑與設(shè)備核查

進(jìn)行玉米赤霉烯酮快速檢測前，需確認(rèn)以下試劑與設(shè)備已備齊：檢測卡（10份/盒，含金標(biāo)微孔）、樣本提取液（35 mL/瓶，配制比例70 mL甲醇+30 mL去離子水）、樣本稀釋液（15 mL/瓶）。設(shè)備方面需準(zhǔn)備離心機(jī)（4000 r/min）或?yàn)V紙、天平、量筒、移液器及一次性吸頭。所有試劑需儲存于4-25℃避光環(huán)境，有效期12個月。檢測環(huán)境應(yīng)保持整潔，避免交叉污染。

8步標(biāo)準(zhǔn)操作流程

步驟1：樣本采集與制備

按照GB/T 5491谷物扦樣規(guī)范采集樣品，四分法縮分至約500 g，粉碎后過20目篩，裝入密封袋備用。樣本需具有代表性，真菌毒素在谷物中分布不均一，大批量樣品應(yīng)多點(diǎn)取樣混合。

步驟2：樣本提取

稱取5 g粉碎樣本至離心管，加入25 mL樣本提取液，振蕩5 min使溶劑充分浸提。4000 r/min離心5 min或使用濾紙過濾，收集上清液作為母液。酸性樣本（如DDGS、啤酒粕、玉米胚芽粕）處理后需用1 mol/LNA2OH調(diào)節(jié)pH至6.5。

步驟3：微孔反應(yīng)

取金標(biāo)微孔，加入60 μL待測樣本上清液，室溫（25℃±2℃）孵育3 min。期間金標(biāo)抗體與樣本中的ZEN發(fā)生競爭結(jié)合反應(yīng)。

步驟4：加樣檢測

將孵育后的液體全部轉(zhuǎn)移到檢測卡加樣孔中，室溫平放，等待液體全滲透。

步驟5：層析反應(yīng)

室溫放置5 min，讓液體自然層析完成。期間膠體金標(biāo)記的抗體-抗原復(fù)合物沿硝酸纖維素膜遷移。

步驟6：結(jié)果判讀

5 min內(nèi)讀取結(jié)果（最長不超過10 min）。判讀方式包括肉眼判讀（陰性/陽性/無效）和專用讀卡儀定量判讀。

步驟7：6檔檢測限選擇

根據(jù)檢測需求選擇對應(yīng)檢測限檔位，不同檔位需使用對應(yīng)量的樣本稀釋液進(jìn)行稀釋：

步驟8：記錄與復(fù)檢

記錄檢測時間、樣本信息、檢測限檔位及判讀結(jié)果。陽性結(jié)果需用國標(biāo)方法（如GB/T 5009.209液相色譜法）確證。

結(jié)果判讀規(guī)范

陰性（-） ：C線（質(zhì)控線）顯色，T線顯色與空白對照一致或接近，表示樣本中ZEN濃度低于所選檢測限。

陽性（+） ：C線顯色，T線不顯色或明顯淺于空白對照，表示樣本中ZEN濃度高于所選檢測限。

無效：C線不顯色，無論T線是否顯色，結(jié)果無效，需重新檢測。可能原因包括樣本加樣量不足、試劑失效或操作失誤。

半定量判讀時，T線顏色深淺與ZEN濃度負(fù)相關(guān)，參考讀卡儀數(shù)值可估算樣本濃度范圍。建議使用讀卡儀進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化判讀，減少肉眼誤差。

注意事項(xiàng)與常見問題

檢測卡僅用于初篩，結(jié)果陽性需送實(shí)驗(yàn)室確證。樣本提取液含甲醇，操作時應(yīng)佩戴防護(hù)手套并在通風(fēng)環(huán)境進(jìn)行。試劑從冷藏環(huán)境取出后需恢復(fù)至室溫（至少30 min）再使用。檢測卡鋁箔袋破損或儲存條件異常時禁用。如樣本渾濁可低速離心后取上清檢測。

結(jié)語

夏糧收購季糧庫、飼料企業(yè)及糧食貿(mào)易商可借助玉米赤霉烯酮快速檢測卡實(shí)現(xiàn)15-20分鐘現(xiàn)場篩查，從源頭把控糧食質(zhì)量安全。冠宇儀器制造（江蘇）有限公司提供玉米赤霉烯酮快速檢測卡及配套檢測試劑，支持夏糧收購快速檢測需求，歡迎后臺咨詢或申請試用樣品。

來源

央視網(wǎng)：超3000萬噸！全國夏糧旺季收購有序開啟（2026/06/23）

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