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一.名稱
英文名:Cy5DIGE NHS ester;Cy5DIGE SE;Cy5DIGE Osu;Cy5DIGE Succinimidyl Ester
中文名:Cy5DIGE 活性酯;Cy5DIGE 琥珀酰亞胺酯
分子量:616.19
Ex(nm):651
Em(nm):670
結構式:

二.產品形式
1.固體/粉末
2.溶于大部分有機溶劑,溶于水
3.端基取代率95%+
4.避免反復凍融,避光保存,儲液應該立即使用,任何未用的溶液分裝小份冷凍于 < -20°C。
三.產品介紹
Cy5DIGE NHS Ester,又稱Cy5DIGE Succinimidyl Ester或Cy5DIGE SE,是Cy5熒光染料與N-羥基琥珀酰亞胺活性酯(NHS ester)的偶聯物。其化學結構設計用于標記蛋白質的氨基基團(主要為賴氨酸殘基),屬于DIGE專用熒光探針,與Cy2DIGE、Cy3DIGE共同構成三色標記體系。
光譜特性
Cy5DIGE NHS Ester的激發波長為651 nm,發射波長為670 nm。該波長處于遠紅色光譜區域,生物組織在此區間的自發熒光極低,因此具有顯著的高信噪比優勢。其摩爾消光系數為250,000 L·mol?1·cm?1,量子 yield約為0.27至0.40。在260 nm處的校正因子為0.02,在280 nm處為0.03,這些參數對于后續F/P值計算至關重要。該染料的熒光對pH不敏感,適用范圍為pH 3至10,可在寬泛的pH條件下穩定工作。
DIGE實驗中的核心作用
雙向熒光差異凝膠電泳(2D-DIGE)的核心邏輯是:將不同處理組的蛋白質樣品分別用Cy2、Cy3、Cy5標記后,混合在同一塊2D凝膠上電泳分離。Cy5DIGE NHS Ester作為第三種熒光顏色,與Cy2和Cy3配合使用,實現三組樣品的同時定量比較。
Cy5DIGE的設計遵循"最小標記"(minimal labeling)策略:每個蛋白質分子僅標記一個熒光分子。這一策略確保標記后蛋白質的等電點和分子量變化極小,從而保證不同顏色標記的樣品在凝膠中共遷移(co-migration),消除因遷移差異導致的定量誤差。三種染料之間的光譜重疊極小,串擾(crosstalk)低,進一步降低了背景噪聲。
四.相關試劑
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Cy5.5 NHS ester
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