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基礎參數
【中文名稱】AZDye 532 琥珀酰亞胺酯 / AZDye 532 活性酯
【英文名稱】AZDye 532 NHS / AZDye 532 NHS Ester / AZDye 532 SE / AZDye 532 OSu / AZDye 532 Succinimidyl Ester
【分子式】C??H??N?O??S?
【分子量】約 723.77 g/mol
【產品純度】≥95% (HPLC)
【外觀性狀】橙黃色固體粉末
【儲存條件】-20℃避光干燥密封保存
【用途】蛋白質/抗體氨基標記、多色流式檢測、細胞成像
【來源】西安強化生物科技

產品介紹
AZDye 532 NHS Ester是一款專為532 nm倍頻Nd:YAG激光線設計的黃色熒光NHS酯標記試劑。它以NHS活性酯形式提供,開瓶即可與含伯胺的生物分子直接反應——無需額外活化,無需催化劑,在弱堿性緩沖液中即完成高效共價偶聯。
該染料在結構上與Alexa Fluor 532一致,吸收/發射光譜與DyLight 532、CF 532等磺化羅丹明核染料匹配。水溶性優異,pH 4至10范圍內發射強度穩定,是多色流式實驗中黃色通道的可靠選擇。
作用機理
NHS酯基團在pH 7-9條件下與生物分子中的伯胺(蛋白質賴氨酸ε-氨基、N端α-氨基、胺基修飾寡核苷酸)發生親核取代反應,生成穩定的酰胺鍵,同時釋放N-羥基琥珀酰亞胺。
反應迅速、專一、副產物少。標記后的偶聯物在532 nm激發下發射554 nm黃色熒光,量子產率約0.85,信號明亮且抗光漂白能力遠優于FITC。
性能參數與競品對比
AZDye 532 NHS Ester的核心優勢集中在三個維度:
亮度:摩爾消光系數約81,000 cm?1M?1,量子產率~0.85,標記后信號強度顯著高于同波段傳統染料AMCA和Coumarin 343。
光穩定性:抗光漂白能力遠超FITC,長時間成像或多輪流式掃描中信號衰減極小,適合需要反復檢測的實驗場景。
光譜兼容性:激發532 nm / 發射554 nm,與FITC(綠)、Cy5(紅)光譜分離度好,多色實驗中無需復雜補償,通道干擾極低。
與AF532相比,AZDye 532性價比更優;與DyLight 532相比,光穩定性更突出;與磺化Cy3相比,分子量更小,標記后對蛋白活性影響更低。
應用領域
多色流式細胞術:配合532 nm激光器標記抗體,檢測細胞表面或胞內靶標,擴展同時檢測通道數。黃色通道與FITC、PE、APC幾乎無光譜重疊,補償矩陣簡潔。
熒光成像與共定位:標記抗體或蛋白質,用于免疫熒光實驗中的多靶標同時檢測。pH 4-10發射穩定,從固定細胞到活細胞成像均可使用。
蛋白質相互作用研究:標記目標蛋白,通過FRET或共定位分析揭示蛋白間相互作用。高量子產率確保供體-受體配對中的信號強度。
HRP熒光雙信號系統:AZDye 532標記辣根過氧化物酶,構建熒光-酶活雙讀出檢測平臺,提升免疫分析靈敏度。
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(本篇圖文信息由西安強化生物科技xw整理!本試劑僅限于科研實驗用途!)
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