基礎(chǔ)參數(shù)

【中文名稱】DyLight 350 活性酯 / DyLight 350 琥珀酰亞胺酯

【英文名稱】DyLight 350 NHS Ester / DyLight 350 SE / DyLight 350 Succinimidyl Ester

【產(chǎn)品純度】≥95% (HPLC)

【外觀性狀】固體

【儲(chǔ)存條件】-20℃干燥避光密封保存

【用途】生物大分子熒光標(biāo)記、多色成像、流式細(xì)胞術(shù)、蛋白質(zhì)互作研究

【來源】西安強(qiáng)化生物科技

產(chǎn)品介紹

DyLight 350 NHS Ester是一款基于氨基甲基乙酸酯（AMCA）骨架、經(jīng)性能全面升級(jí)的高性能藍(lán)色熒光標(biāo)記試劑。在353 nm紫外光激發(fā)下發(fā)射峰值432 nm的明亮藍(lán)光，光譜覆蓋420-450 nm。它是AMCA的進(jìn)化體——熒光強(qiáng)度顯著更高、水溶性更優(yōu)、光穩(wěn)定性更強(qiáng)，專為填補(bǔ)多色實(shí)驗(yàn)中藍(lán)色通道的空白而設(shè)計(jì)。

以NHS活性酯形式提供，開瓶即用，在pH 8.0-9.0的弱堿性緩沖液中即可與生物分子中的伯胺高效偶聯(lián)，無需額外活化步驟。

作用機(jī)理

NHS酯基團(tuán)與蛋白質(zhì)賴氨酸ε-氨基或N端α-氨基發(fā)生親核取代反應(yīng)，生成穩(wěn)定的酰胺鍵，同時(shí)釋放N-羥基琥珀酰亞胺。反應(yīng)在pH 7-9范圍內(nèi)進(jìn)行最為高效，副產(chǎn)物少，偶聯(lián)物穩(wěn)定。標(biāo)記完成后，DyLight 350熒光團(tuán)在紫外激發(fā)下發(fā)出明亮藍(lán)光，實(shí)現(xiàn)共價(jià)熒光標(biāo)記。

該染料對(duì)pH 4至10均保持熒光強(qiáng)度穩(wěn)定，這意味著從酸性溶酶體到中性胞質(zhì)，信號(hào)不衰減——這是傳統(tǒng)AMCA無法做到的。

性能參數(shù)與競(jìng)品對(duì)比

DyLight 350 NHS Ester的核心優(yōu)勢(shì)可以用三個(gè)字概括：亮、溶、穩(wěn)。

亮度：消光系數(shù)和量子產(chǎn)率均優(yōu)于傳統(tǒng)AMCA和Alexa Fluor 350，同等條件下熒光強(qiáng)度明顯更高，檢測(cè)靈敏度直接拉滿。

水溶性：高水溶性意味著可以使用更高的染料-蛋白比而不發(fā)生沉淀，獲得更均一、更 brightly labeled 的偶聯(lián)產(chǎn)物。這在多色實(shí)驗(yàn)中尤為關(guān)鍵——標(biāo)記密度上去了，信號(hào)才夠強(qiáng)。

光譜兼容性：激發(fā)353 nm / 發(fā)射432 nm，與AF488（綠）、AF594（紅）光譜分離度，多色流式中補(bǔ)償矩陣簡(jiǎn)潔，幾乎無通道干擾。

與AF350相比，DyLight 350亮度更高；與AMCA相比，光穩(wěn)定性和水溶性全面勝出；與傳統(tǒng)藍(lán)色染料相比，pH不敏感性是最大的實(shí)用優(yōu)勢(shì)。

應(yīng)用領(lǐng)域

多色流式細(xì)胞術(shù)：作為藍(lán)色熒光通道，與AF488、PE、APC等聯(lián)用，實(shí)現(xiàn)多參數(shù)細(xì)胞群體分析。藍(lán)色通道在流式中長(zhǎng)期被忽視，DyLight 350讓這個(gè)通道真正可用。

免疫熒光與共聚焦成像：標(biāo)記抗體后用于細(xì)胞內(nèi)蛋白定位，pH 4-10信號(hào)穩(wěn)定，從固定細(xì)胞到活細(xì)胞成像均可勝任。與AF488、AF594組合，三色共定位實(shí)驗(yàn)干凈利落。

蛋白質(zhì)互作研究：與受體熒光團(tuán)配對(duì)，通過FRET技術(shù)解析分子間相互作用距離及動(dòng)力學(xué)。高量子產(chǎn)率確保供體端信號(hào)充足。

Western Blot熒光檢測(cè)：標(biāo)記一抗或二抗，替代傳統(tǒng)HRP顯色體系，實(shí)現(xiàn)多通道同時(shí)檢測(cè)，靈敏度與特異性兼顧。

細(xì)胞膜動(dòng)態(tài)追蹤：與磷脂分子反應(yīng)標(biāo)記細(xì)胞膜表面，實(shí)時(shí)觀察細(xì)胞遷移、膜融合或內(nèi)吞作用，藍(lán)色通道不干擾其他熒光信號(hào)。

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（本篇圖文信息由西安強(qiáng)化生物科技xw整理！本試劑僅限于科研實(shí)驗(yàn)用途！）

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