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基礎參數
【中文名稱】AZDye 568 琥珀酰亞胺酯 / AZDye 568 活性酯
【英文名稱】AZDye 568 NHS Ester / AZDye 568 SE / AZDye 568 OSu / AZDye 568 Succinimidyl Ester
【分子量】791.8
【產品純度】≥95% (HPLC)
【外觀性狀】固體
【儲存條件】-20℃干燥避光密封保存
【用途】生物大分子熒光標記、多色流式檢測、超分辨成像
【來源】西安強化生物科技

產品介紹
AZDye 568 NHS Ester是一款專為568 nm激光線設計的橙色熒光NHS酯標記試劑,為Alexa Fluor 568 NHS Ester的等同替代產品。激發波長578 nm,發射波長602 nm,呈現明亮的橙紅色熒光,與AF568光譜高度一致,可直接替代使用。
該試劑以NHS活性酯形式提供,開瓶即可與蛋白質賴氨酸ε-氨基或N端α-氨基高效偶聯——無需額外活化,無需催化劑,在弱堿性緩沖液中即完成共價標記。高水溶性確保標記后偶聯物在水相中穩定存在,不易聚集沉淀。
作用機理
NHS酯基團在pH 7.2–8.0條件下與生物分子中的伯胺(蛋白質賴氨酸ε-氨基、N端α-氨基、胺基修飾寡核苷酸)發生親核取代反應,生成穩定的酰胺鍵,同時釋放N-羥基琥珀酰亞胺。
反應快速、專一、副產物少。標記后的偶聯物在578 nm激發下發射602 nm橙紅色熒光,量子產率高,信號明亮。該染料在pH 4至10范圍內熒光強度穩定,從酸性溶酶體到中性胞質,信號不衰減。
性能參數與競品對比
AZDye 568 NHS Ester的核心優勢集中在四個維度:
亮度:摩爾消光系數約88,000 cm?1M?1,量子產率約0.82,標記后信號強度顯著優于傳統TAMRA和磺化Cy3,檢測靈敏度直接拉滿。
光穩定性:抗光漂白能力遠超TAMRA和PE,長時間共聚焦成像或多輪流式掃描中信號衰減極小,適合需要反復檢測的實驗場景。
水溶性:高水溶性意味著可以使用更高的染料-蛋白比而不發生沉淀,獲得更均一、更明亮的偶聯產物。高摩爾比下不易發生顯著自猝滅,靈敏度更高。
光譜兼容性:激發578 nm / 發射602 nm,與FITC/AF488(綠)、APC/Cy5(紅)光譜分離良好。斯托克斯位移約24 nm,橙色通道與綠色、紅色通道幾乎無重疊,多色實驗中補償矩陣簡潔。
與AF568相比,AZDye 568性價比更優;與TAMRA相比,光穩定性和水溶性全面勝出;與磺化Cy3相比,分子量更小,標記后對蛋白活性影響更低。
應用領域
多色流式細胞術:配合568 nm激光器標記抗體,檢測細胞表面或胞內靶標,擴展同時檢測通道數。橙色通道與FITC、PE、APC光譜分離度,補償矩陣簡潔,幾乎無通道干擾。
超分辨顯微成像:光物理特性適配dSTORM等單分子定位技術,提供高解析度細胞結構圖像,是隨機光學重建顯微鏡的理想選擇。
免疫熒光與共聚焦成像:標記抗體后用于細胞內蛋白定位,pH 4-10信號穩定,從固定細胞到活細胞成像均可勝任。與DAPI、Cy3組合,三色共定位實驗干凈利落。
Western Blot熒光檢測:標記一抗或二抗,替代傳統HRP顯色體系,實現多通道同時檢測,靈敏度與特異性兼顧。
生物正交標記:與DBCO、疊氮等點擊化學基團聯用,構建靶向熒光探針,用于活細胞長時程示蹤。
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(本篇圖文信息由西安強化生物科技xw整理!本試劑僅限于科研實驗用途!)
供應商:西安強化生物科技有限公司
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