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基礎參數
【中文名稱】AFDye 488 活性酯;AFDye 488 琥珀酰亞胺酯
【英文名稱】AFDye 488 NHS ester;AFDye 488 SE;AFDye 488 Osu;AFDye 488 Succinimidyl Ester
【分子式】C25H15Li2N3O13S22
【分子量】643.41
【產品純度】≥95%
【外觀性狀】固體/粉末
【儲存條件】-20℃以下冰凍、干燥、避光保存
【用途】試劑僅用于科研實驗
【來源】西安強化生物科技
產品介紹
AFDye 488 NHS Ester是一種高性能綠色熒光標記試劑,由磺化呫噸類熒光染料AFDye 488與N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)活性酯基團共價連接而成,光譜特性等同于Alexa Fluor® 488 NHS Ester。該試劑激發波長494 nm、發射波長517 nm,與488 nm氬離子激光器匹配,可在生理pH范圍(pH 4-10)內保持穩定熒光輸出,不受酸堿環境干擾。磺酸基團賦予分子優異水溶性,有效抑制聚集與非特異性吸附,可直接溶于水性緩沖液操作,無需引入有機溶劑,從根本上規避蛋白變性風險。
作用機理
NHS酯基團在pH 7.2-8.5的弱堿性條件下,與蛋白質、多肽、抗體表面的伯胺基團(賴氨酸ε-氨基或N端α-氨基)發生親核取代反應,釋放N-羥基琥珀酰亞胺,同時形成穩定的酰胺鍵共價連接。反應快速、選擇性高,副產物無毒且易通過透析或凝膠過濾去除,不損傷生物分子的天然結構與活性。標記后的生物分子可被488 nm激光高效激發,發出明亮的綠色熒光,適用于從基礎蛋白研究到超分辨成像的多層次應用。
性能參數與競品對比
AFDye 488 NHS Ester的摩爾消光系數約71,000 cm?1M?1,熒光量子產率高,光穩定性顯著優于傳統FITC等綠色染料。與FITC相比:亮度更高、抗光漂白能力強數倍,適合長時間動態追蹤;與Alexa Fluor® 488相比:光譜一致,性價比更優,且避免品牌溢價;與Cy3相比:激發波長更短(494 nm vs 550 nm),儀器兼容性更廣,背景自發熒光更低。磺酸基團帶來的水溶性優勢使其在水性體系中標記均一性遠超脂溶性NHS酯,尤其適合活細胞表面標記與流式多色分選場景。
應用領域
該試劑應用方向成熟且覆蓋廣泛:其一,免疫熒光與細胞成像,標記抗體用于IF、共聚焦及超分辨顯微鏡觀察,高亮度與強光穩定性支持長時間多輪次掃描;其二,流式細胞術多色分析,與APC、AF647等遠紅外染料聯用可實現四色至五色分選,光譜分離良好、補償矩陣簡潔;其三,熒光定量PCR,結合胺修飾寡核苷酸實現目標核酸的高靈敏度定量檢測;其四,原位雜交與蛋白質相互作用研究,標記DNA/RNA探針進行基因定位,或通過FRET實驗追蹤分子間相互作用。
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(本篇圖文信息由西安強化生物科技xw整理!本試劑僅限于科研實驗用途!)
供應商:西安強化生物科技有限公司
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