基礎參數

【中文名稱】AFDye 594 琥珀酰亞胺酯、AFDye 594 活性酯

【英文名稱】AFDye 594 NHS Ester、AFDye 594 SE、AFDye 594 Succinimidyl Ester、AFDye 594 Osu

【產品純度】≥95%

【外觀性狀】固體

【儲存條件】-20℃以下干燥、避光、防潮保存

【用途】試劑僅用于科研實驗

【來源】西安強化生物科技

產品介紹

AFDye 594 NHS Ester是一種高亮度紅色熒光胺反應性標記試劑，由Alexa Fluor 594熒光母核與N-羥基琥珀酰亞胺酯（NHS Ester）活性基團共價連接而成，光譜特性等同于Alexa Fluor® 594 NHS Ester。該試劑最大激發波長590–594 nm，最大發射波長613–617 nm，摩爾消光系數高達約92,000 cm?1M?1，具有的熒光量子產率。分子結構中的磺化親水基團賦予其優異水溶性，可兼容水相與有機相反應體系。相較于傳統Texas Red，AFDye 594在亮度、光穩定性和水溶性三個關鍵指標上均有明顯提升，是Texas Red的理想升級替代方案。

作用機理

NHS酯基團在pH 7.5–8.5的弱堿性緩沖液中，與蛋白質、抗體、多肽表面的伯胺基團（賴氨酸ε-氨基或N端α-氨基）發生親核取代反應，釋放N-羥基琥珀酰亞胺，同時形成穩定的酰胺鍵共價連接。該反應選擇性高，不與巰基、羥基或羧基發生交叉反應。標記后的生物分子在590–594 nm激發下發出明亮的橙紅色熒光（613–617 nm），可被561 nm或594 nm激光譜線高效激發，適用于從免疫熒光到超分辨成像的多層次應用。需注意：NHS酯基對水分敏感，強烈推薦先用無水DMSO或DMF溶解配制母液，再加入反應體系，水溶液中極易水解為非活性游離酸。

性能參數與競品對比

AFDye 594 NHS Ester的核心優勢在于三個維度。與TRITC相比：光穩定性顯著更優，在固定細胞中連續激光照射后信號衰減幅度極小，適合長時間共聚焦成像與反復掃描。與Cy3相比：亮度更高、水溶性更強，四磺酸結構確保染料不引起蛋白疏水化聚集沉淀，標記均一性遠勝。與Texas Red相比：摩爾消光系數更高（92,000 vs ~70,000 cm?1M?1），pH耐受范圍更寬（pH 4–10），且不易發生自聚集導致的熒光猝滅。紅色熒光通道與AF488（綠色）、AF647（遠紅外）光譜分離良好，是三色乃至四色共定位實驗的理想紅色通道選擇。

應用領域

該試劑應用方向成熟且覆蓋面廣：其一，免疫熒光與組織切片多色共定位，標記一抗或二抗用于共聚焦顯微鏡觀察，橙紅色熒光在神經組織或腫瘤切片中能清晰襯托目標蛋白，與AF488組合可實現雙色共定位分析；其二，流式細胞術多色分析，作為第三或第四個顏色通道，與FITC、PE、APC等經典染料光譜分離良好，補償矩陣簡潔；其三，氨基修飾寡核苷酸標記，與5'-或3'-氨基修飾的DNA/RNA探針反應制備熒光探針，用于原位雜交、實時定量PCR及毛細管電泳；其四，納米材料與脂質體功能化修飾，標記氨基化納米顆粒或含氨基磷脂，用于熒光示蹤與藥物遞送研究。

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（本篇圖文信息由西安強化生物科技xw整理！本試劑僅限于科研實驗用途！）

供應商：西安強化生物科技有限公司