【中文名稱】AF488疊氮，Alexa Fluor488 疊氮

【英文名稱】AF488 azide，AF488-N3，Alexa Fluor488 azide，Alexa Fluor488 N3

【CAS號】1679326-36-3

【分子式】C24H18K2N6O10S2

【分子量】692.76

【最大吸收波長】495 nm

【最大發(fā)射波長】519 nm

【產(chǎn)品純度】≥95%

【儲存條件】-20℃密封避光，遠(yuǎn)離強(qiáng)還原劑，避免長時間暴露在高濕度環(huán)境中

【用途】科研級綠色通道無銅點(diǎn)擊熒光標(biāo)記試劑

產(chǎn)品介紹

AF488 azide，AF488-N3，Alexa Fluor488 azide，Alexa Fluor488 N3

AF488 azide是將AF488高亮度綠色熒光基團(tuán)與疊氮活性基團(tuán)通過穩(wěn)定的連接臂共價結(jié)合制備而成的特色點(diǎn)擊熒光試劑。它完整保留了AF488染料適配488 nm標(biāo)準(zhǔn)激光的優(yōu)異熒光性能，同時依托疊氮基團(tuán)的專屬點(diǎn)擊反應(yīng)活性，可在無銅催化的溫和條件下與DBCO類環(huán)辛炔分子發(fā)生高效特異性連接，規(guī)避了銅催化點(diǎn)擊反應(yīng)帶來的生物樣本氧化損傷問題，是活細(xì)胞熒光標(biāo)記、生物分子點(diǎn)擊示蹤、綠色通道低背景成像場景的核心工具試劑。

作用機(jī)理

AF488 azide分子的AF488熒光母核，在488 nm標(biāo)準(zhǔn)激光激發(fā)下，可發(fā)射出519 nm的高亮度綠色特征熒光，熒光量子產(chǎn)率高，抗光漂白性能遠(yuǎn)超傳統(tǒng)FITC類熒光染料，連續(xù)激光照射30分鐘后熒光信號保留率仍高于88%。分子末端的疊氮活性位點(diǎn)，可在無銅離子參與的常溫溫和條件下，與DBCO等環(huán)辛炔類分子發(fā)生專屬的環(huán)張力驅(qū)動無銅點(diǎn)擊反應(yīng)，反應(yīng)特異性，幾乎不會與生物樣本中的內(nèi)源性基團(tuán)發(fā)生非特異性結(jié)合，全程不會產(chǎn)生銅離子引發(fā)的生物大分子氧化失活、細(xì)胞毒性等副反應(yīng)，可直接用于活細(xì)胞與活樣本體系的標(biāo)記實(shí)驗。

性能參數(shù)與競品對比

相較于傳統(tǒng)FITC azide熒光試劑，該試劑的熒光亮度提升1.6倍，且不受環(huán)境pH 6.0-9.0區(qū)間小幅波動的影響，熒光強(qiáng)度無明顯衰減，解決了傳統(tǒng)異硫氰酸酯類染料易受pH干擾、光漂白快的痛點(diǎn)。它的化學(xué)穩(wěn)定性優(yōu)異，在常規(guī)無水DMSO中-20℃密封放置6個月，疊氮活性與熒光亮度幾乎無損失，遠(yuǎn)高于普通FITC類疊氮試劑3個月內(nèi)就出現(xiàn)的染料降解問題。和同類型其他品牌的AF488 azide產(chǎn)品相比，該試劑無游離未偶聯(lián)的AF488染料雜質(zhì)殘留，后續(xù)點(diǎn)擊標(biāo)記后的樣本背景信噪比提升60%，無需額外的復(fù)雜洗滌步驟即可獲得干凈的成像結(jié)果。

應(yīng)用領(lǐng)域

可用于活細(xì)胞內(nèi)蛋白的點(diǎn)擊熒光示蹤，將DBCO基團(tuán)通過代謝標(biāo)記技術(shù)引入活細(xì)胞內(nèi)的靶標(biāo)蛋白中，再加入AF488 azide試劑進(jìn)行無銅點(diǎn)擊標(biāo)記，全程無銅離子毒性，可在不影響細(xì)胞正常活性的前提下，清晰示蹤靶標(biāo)蛋白在活細(xì)胞內(nèi)的動態(tài)轉(zhuǎn)運(yùn)過程。可用于細(xì)胞表面聚糖的代謝熒光標(biāo)記，通過代謝糖工程將DBCO修飾的糖分子整合到細(xì)胞表面的聚糖結(jié)構(gòu)中，再用AF488 azide進(jìn)行點(diǎn)擊標(biāo)記，可在綠色通道清晰觀測細(xì)胞表面聚糖的分布與動態(tài)變化，背景極低無明顯非特異性染色。也可用于凝膠電泳的點(diǎn)擊熒光可視化檢測，將DBCO修飾的核酸或蛋白樣本通過電泳分離后，直接用AF488 azide進(jìn)行凝膠內(nèi)點(diǎn)擊孵育，即可在綠色熒光成像系統(tǒng)中直接得到高對比度的條帶信號，檢測靈敏度遠(yuǎn)高于傳統(tǒng)的核酸染料染色方法。

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（本篇圖文信息由西安強(qiáng)化生物科技xw整理！本試劑僅限于科研實(shí)驗用途！）

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