迪馬科技在成功建立動物性食品中全氟化合物檢測方法的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步開發(fā)了水產(chǎn)品中全氟化合物的系統(tǒng)檢測方案。本方案基于前序研究的核心技術(shù)路線，采用乙腈溶劑提取目標(biāo)物后，通過分散式石墨化碳黑(Carb)凈化管進(jìn)行初級凈化處理，經(jīng)超純水稀釋后，再結(jié)合弱陰離子交換固相萃取柱實施二次凈化。經(jīng)方法驗證，該方案可有效應(yīng)用于魚、蝦、蟹類、牛蛙及貝類等水產(chǎn)品的檢測。值得注意的是，在方法應(yīng)用過程中發(fā)現(xiàn)貝類樣品因基質(zhì)成分復(fù)雜，導(dǎo)致全氟十八酸(PFODA)出現(xiàn)回收率異常升高的現(xiàn)象。通過系統(tǒng)方法學(xué)優(yōu)化實驗，最終確定當(dāng)貝類樣品(蛤蜊)取樣量控制為1g時，目標(biāo)化合物回收率在合格范圍內(nèi)，滿足檢測方法學(xué)要求。

本方案適用于魚、蝦、蟹類、牛蛙、貝類17種全氟化合物的檢測。

(1)17種全氟化合物標(biāo)準(zhǔn)儲備液：50μg/mL溶于甲醇，1mL/安瓿，迪馬科技標(biāo)準(zhǔn)品部提供 (Cat.#: 48008)；

(2)17種全氟化合物中間液Ⅰ: 量取定量儲備液，用甲醇溶解配制成濃度為1μg/mL的溶液；

(3)17種全氟化合物中間液Ⅱ: 量取定量混標(biāo)中間液Ⅰ，用甲醇溶解配制成濃度為0.1μg/mL溶液。

3.1 魚、蝦、蟹、牛蛙樣品

3.1.1 稱取2g樣品于50mL離心管中，加入2g氯化鈉，攪拌均勻。

3.1.2 加入2mL純凈水，渦旋混勻。

3.1.3 加入10mL乙腈，渦旋混勻10min，8000rpm離心5min。

3.1.4 取上層乙腈，加入到裝有100mg 石墨化碳黑(Carb) 的15mL離心管中，渦旋混勻5min，8000rpm離心5min。

3.1.5 取上清到50mL離心管，用純凈水定容到30mL，渦旋混勻，8000rpm離心5min。

3.1.6 上清液備用。

3.2 蛤蜊樣品

3.2.1 稱取1g樣品于50mL離心管中，加入2g氯化鈉，攪拌均勻。

3.2.2 加入2mL純凈水，渦旋混勻。

3.2.3 加入10mL乙腈，渦旋混勻10min，8000rpm離心5min。

3.2.4 取上層乙腈，加入到裝有100mg 石墨化碳黑(Carb) 的15mL離心管中，渦旋混勻5min，8000rpm離心5min。

3.2.5 取上清到50mL離心管，用純凈水定容到30mL，渦旋混勻，8000rpm離心5min。

3.2.6 上清液備用。

ProElut^® PWA-2 250mg/6mL (Cat.#: 65823)

(1)活化：用15mL 1%氨化甲醇、5mL水、5mL 0.3mol/L甲酸水活化；

(2)上樣：備用液上樣，棄去流出液；

(3)淋洗：用10mL 水、5mL甲醇淋洗；

(4)洗脫：加入5mL 1% 氨水甲醇溶液洗脫，收集洗脫液；

(5)重新溶解：將洗脫液在40℃水浴下氮吹至干，用甲醇定容至1.0mL，混勻，8000rpm離心5分鐘，上機(jī)分析。

注：同方法制備基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液

(1) UPLC條件

色譜柱：Endeavorsil^® C18, 100x2.1mm, 1.8μm (Cat.#: 87003)

流速：0.3mL/min        

進(jìn)樣量：5μL      

柱溫：40℃

流動相：A: 2mmol/L甲酸銨溶液             B: 甲醇

梯度設(shè)置

(2) 質(zhì)譜條件

電離模式：ESI

掃描方式：負(fù)離子掃描

檢測方式：多反應(yīng)監(jiān)測

電噴霧電壓：-4500V

霧化氣壓力：50psi

輔助氣壓力：50psi

氣簾氣壓力：20psi

離子源溫度：500℃