1、斷頸法處死小鼠

固定小鼠捏住小鼠尾根部，將小鼠放置在籠蓋上，定位頸椎鑷子或拇指與食指，緊貼小鼠頭后部、兩耳連線后方（頸椎第一節位置），牢牢按壓固定頭部。握緊鼠尾根部，向后、向上快速用力牽拉，同時左手固定頭部不動。 可清晰聽到 / 感受到頸椎斷裂的輕微脆響，此時脊髓與腦干分離，確保死亡，避免假死。

PS:注意避免被小鼠咬傷（致敬每一只科研用鼠）

2、取小腸

用75%的酒精對小鼠表面進行消毒，使用手術剪剪開小鼠腹部皮膚并暴露腹腔； 在小腸胃與十二指腸連接處剪開，一邊分離小腸周圍脂肪組織和腸系膜，一邊拉出小腸，之后在小腸和盲腸 連接處剪斷，從而分離出小腸，將小腸放入裝有10mL 1xPBS（abs962）的培養皿中；

3、去除表面脂肪+縱向剪開小腸+清洗

使用眼科剪剪去小腸表面的派氏結和去除表面所有的脂肪和腸系膜殘余組織，再用剪刀縱向剪開小腸暴露內容物，并在培養皿中沖洗干凈；

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4、剪切并消化小腸

將小腸剪成0.5cm左右的小段，在37℃培養箱中，80rpm孵育30 min，取出解離后小腸，用移液槍吹打數次。

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5、過篩+離心

將解離好的細胞懸液使用70 μm細胞篩網過濾至新的50 mL離心管中，加入3-5 mL預冷PBS沖洗篩網并過濾，將得到的細胞懸液在4℃，400 g條件下離心5 min，棄去上清；細胞沉淀使用預冷的1x PBS（abs962）緩沖液重懸，4℃，400 g條件下離心5 min，棄去上清；

解離后小腸過篩

離心后小腸