實驗樣本如何選擇與處理？

本實驗采用健康人外周血作為樣本來源，使用 EDTA 抗凝采血管收集新鮮血液，樣本采集后 4 小時內完成處理。實驗前將血液樣本輕輕顛倒混勻 8-10 次，確保細胞分布均勻，避免局部細胞聚集影響計數準確性。樣本處理采用免洗裂紅法，可保留淋巴細胞活性與數量，減少操作過程中的細胞損失。

實驗需要準備哪些關鍵試劑與耗材？

實驗核心試劑與耗材均選用愛必信生物高品質產品：絕對計數管（貨號：abs9907，規格：50T），預裝有精確數量的熒光微球，可直接用于絕對計數；PBS 緩沖液（1×）（貨號：abs962，規格：500mL），用于樣本稀釋與儀器沖洗；紅細胞裂解液（1×）（貨號：abs9101，規格：100mL），經配方優化，裂解紅細胞同時幾乎不損傷有核細胞。此外還需 BD 公司補償微球及 CD3、CD4（APC）、CD8（BV421）、CD45（V500）系列流式抗體。

標準化實驗操作流程是怎樣的？

采用反向移液技術吸取 50μL 混勻樣本，加入絕對計數管底部，移液器前端避免接觸管底，防止血液接觸管壁上部。在流式管底部加入相應體積流式抗體，輕輕渦旋混勻約 3 秒，室溫避光反應 25 分鐘。隨后加入 450μL 紅細胞裂解液，渦旋 15 秒，室溫避光反應 10 分鐘。免洗處理，輕輕渦旋 10 秒后即可上機檢測。該流程操作簡便，全程約 40 分鐘，適合臨床樣本快速檢測。

實驗結果可靠性如何？

我們對 abs9907 絕對計數管的 A、B 兩個批次進行了平行驗證，結果顯示兩批次產品的微球計數 CV 值均小于 3%，淋巴細胞亞群絕對計數結果重復性良好，與進口同類產品具有高度一致性。

A批次：

B批次：

實驗證明，愛必信絕對計數管性能穩定，可滿足臨床與科研中淋巴細胞亞群絕對計數的需求。