一、產品基本規格

項目 | 規格

靶標 | MED1（介質復合物亞基1）

驗證反應種屬 | 小鼠、人 |

適用應用 | IHC（免疫組織化學）、IP（免疫沉淀）、WB（蛋白質印跡）

宿主 | 兔

克隆性 | 多克隆

抗體形式 | 完整IgG

免疫原 | 人MED1蛋白第1531位至C末端區域

同種型 | IgG

標記類型 | 未偶聯（Unconjugated）

純度 | 抗原親和純化

抗原種屬來源 | 人

工作濃度 | 1000 µg/ml

儲存條件 | 2 - 8 °C

有效期 | 自收貨之日起1年

緩沖體系 | Tris-檸檬酸鹽/磷酸鹽緩沖液，pH 7~8，含0.09%疊d化鈉

二、產品制備與質量控制

本抗體由艾美捷代理Bethyl推出，貨號：A300-793A，采用抗原親和純化工藝制備，具體流程與質控參數如下：

親和純化：使用固相載體上固定的MED1特異性表位肽段進行親和層析，確保高特異性識別MED1蛋白。

表位定位：識別表位對應于人介質復合物亞基1（MED1）第1525位至C末端（第1581位）之間的區域，參考序列編號NP_004765.2（GeneID 5469）。

濃度測定：免疫球蛋白濃度通過比爾定律（Beer's Law）確定，以1 mg/mL IgG在A280波長下吸光度為1.4作為換算基準。

三、靶標生物學信息

MED1是介質復合物（Mediator complex）的核心組分之一。介質復合物作為轉錄共激活因子，參與幾乎所有RNA聚合酶Ⅱ依賴性基因的調控轉錄過程。其核心功能包括：

信號傳導橋梁：介質復合物充當基因特異性調控蛋白與基礎RNA聚合酶Ⅱ轉錄裝置之間的信息傳遞橋梁；

啟動子募集：通過與調控蛋白直接相互作用，介質復合物被招募至啟動子區域；

預起始復合物組裝：作為支架蛋白，介質復合物促進RNA聚合酶Ⅱ及通用轉錄因子組裝為功能性的預起始復合物（preinitiation complex）。

MED1通過其C末端區域與多種核受體（包括甲狀腺激素受體、過氧化物酶體增殖物激活受體PPAR、維生素D受體等）直接相互作用，在激素信號轉導、代謝調控及發育過程中發揮關鍵作用。

四、推薦實驗條件與操作要點

以下為各應用場景的推薦稀釋比例及關鍵操作參數，供實驗設計參考。

1. 免疫組織化學（IHC）

推薦稀釋比：1:1,000 ~ 1:5,000

抗原修復：推薦使用pH 6.0檸檬酸鹽緩沖液進行熱誘導抗原修復（HIER），適用于福爾馬林固定石蠟包埋（FFPE）組織切片。

適用范圍：組織切片中MED1蛋白的原位檢測，適用于介質復合物在組織水平表達分布及病理學評估。

2. 免疫沉淀（IP）

推薦用量：6 µg抗體/毫克蛋白裂解液

適用范圍：細胞裂解液中MED1蛋白的富集，適用于介質復合物組分共沉淀分析或下游WB檢測。

操作建議：建議使用Protein A瓊脂糖珠進行免疫復合物捕獲；沉淀前建議進行預清除（Pre-clearing）步驟以降低非特異性結合。

3. 蛋白質印跡（WB）

推薦稀釋比：1:2,000 ~ 1:10,000

封閉與稀釋液：5% Milk-TBST（含Tween-20的TBS緩沖液）

一抗孵育：推薦4°C孵育過夜（O/N），以確保低豐度信號的有效檢測。

二抗選擇：

-細胞裂解液WB：推薦使用山羊抗兔IgG重鏈和輕鏈抗體（如A120-101P）進行信號放大。

-免疫沉淀物WB：推薦使用抗兔IgG輕鏈HRP偶聯抗體，并在封閉緩沖液中添加5%正常豬血清（Cat. No. S100-020），以有效降低重鏈交叉反應的干擾。

適用范圍：細胞裂解液或IP富集產物中MED1蛋白表達水平及遷移行為的分析。MED1預測分子量約為158 kDa，實際電泳遷移可能存在差異。

4. 通用操作注意事項

樣本制備：推薦使用含蛋白酶抑制劑的RIPA或NP-40裂解液制備細胞裂解物，以保持MED1蛋白完整性。核蛋白提取可提高轉錄相關因子的檢測效率。

陽性對照：推薦使用HeLa、293T等表達MED1水平較高的細胞系裂解液作為陽性對照。

疊氮化物注意事項：緩沖液含0.09%疊d化鈉作為防腐劑，若后續IP洗脫或WB檢測體系涉及HRP偶聯二抗，需注意疊氮化物對HRP活性的抑制作用。

五、儲存與穩定性

儲存條件：2 ~ 8°C冷藏保存，嚴禁冷凍。

有效期：自收貨之日起1年內保持穩定。

分裝建議：如需長期使用，建議按單次用量分裝后儲存于2 ~ 8°C，避免反復取用導致污染或活性下降。

六、應用場景建議

本抗體適用于以下研究領域：

轉錄調控機制研究：MED1作為介質復合物的核心亞基，適用于RNA聚合酶Ⅱ依賴性基因轉錄的調控機制探索；

核受體信號轉導分析：MED1與甲狀腺激素受體、PPAR、維生素D受體等互作，適用于激素信號通路及代謝調控研究；

蛋白質互作網絡分析：結合IP-WB技術，可用于MED1與介質復合物其他組分（如MED14、MED17等）的共沉淀驗證；

組織病理學評估：通過IHC檢測MED1在不同組織及腫瘤樣本中的表達水平及定位。