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實驗原理蛙或蟾蜍等兩棲類動物的一些基本生命活動和生理功能與溫血動物相似,而其離體組織生活條件易于掌握,在任氏液的浸潤下,神經肌肉標本可較長時間保持生理活性,因此,在生理學實驗中常用蛙或蟾蜍坐骨神經腓腸肌離體標本來觀察神經肌肉的興奮性、興奮過程以及骨骼肌收縮特點等。實驗設備蛙類手術器械和藥品1套,包括:蛙板、小玻板各1塊,粗剪刀、直剪刀各1把,大鑷子、小鑷子各1把,眼科剪刀1把、探針1根、玻璃分針2根,大燒杯、小燒杯各1個,滴管1支,培養皿1個,棉線,任氏液,鋅銅叉。實驗步驟1.破壞腦脊髓:取蟾蜍
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轉載請注明:解螺旋·臨床醫生科研成長平臺酶聯免疫吸附測定(ELISA)因其具有敏感性高、特異性強等優點,被廣泛應用于臨床檢測中的各種抗原和抗體的測定。盡管ELISA操作簡單,但是小實驗里也蘊含著大文章,ELISA操作各個環節對實驗的檢測效果影響較大,稍不注意就會產生假陽性或假陰性的結果。現在小魚就跟大家818應用ELISA應該了解的一些常識。ELISA分類及具體過程一般,ELISA可分為以下四大類:直接ELISA、間接ELISA、夾心ELISA、競爭抑制ELISA。其他的ELISA都隸屬于這四類
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理性闡述qPCR實驗的Ct值的合理范圍。(附Ct值過大或過小的解決方法)Ct值是什么?Ct值具有什么樣的作用?Ct值的正常范圍是多少?Ct值太大或者太小的原因?Ct值是熒光定量PCR重要的結果呈現形式。它被用于計算基因表達量差異或者基因拷貝數。那么熒光定量的Ct值多大可被認為是合理?如何保證Ct值的有效范圍呢?今天就讓小編來為大家解答這個問題。Ct值是什么?qPCR擴增過程中,擴增產物的熒光信號達到設定的熒光閾值時的所對應的擴增循環數(CycleThreshold)。C代表Cycle,T代表Th
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石蠟切片免疫組化實驗步驟1.石蠟切片置于67℃烘箱中,烘片2小時,脫蠟至水,用pH7.4的PBS沖洗三次,每次3分鐘(3×3’)。2.取一定量pH=6.0檸檬酸鹽緩沖液,加入微波盒中,微波加熱至沸騰,將脫蠟水化后的組織切片置于耐高溫塑料切片架上,放入已沸騰的緩沖液中,中檔微波處理10分鐘,取出微波盒流水自然泠卻,從緩沖液中取出玻片,先用蒸餾水沖洗兩次,之后用PBS沖洗2×3’。(注:不是所有的抗體都需要微波修復的,視具體情況而定)3.每張切片加1滴3%H2O2,室溫下孵育10分鐘,以阻斷內源性過
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實驗試劑1.包被緩沖液:(0.05mol/L,pH9.6的碳酸鹽緩沖液)Na2CO31.59gNaHCO32.93g蒸餾水1000ml4℃保存,一周內用完。2.磷酸鹽緩沖液(PBS,PH7.4)NaCl8.0gKH2PO40.2gKCl0.2gNa2HPO4.12H2O3.65g蒸餾水1000ml3.洗滌液(0.01mol/L,pH7.4的PBST)1LPBS中加入0.5mlTween-204.封閉液(5%脫脂奶粉)5g脫脂奶粉加入100mlPBS緩沖液中。5.一抗及二抗稀釋液(2%脫脂奶粉)2
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實驗試劑裂解液(pH8.5-9.0):50mMTris-HCl,2mMEDTA,100mMNaCl,0.5%TritonX-100,調pH值至8.5-9.0備用;溶菌酶;蛋白酶抑制劑PMSF;1%SDS溶液;Trizol裂解液;無水乙醇;異丙醇;0.3M鹽酸胍;疏水性蛋白提取液(非裂解液):1%TritonX-114,150mMNaCl,10mMTris-HCl,1mMEDTA,調pH值至8.0備用。實驗設備高速離心機;超聲儀;透析袋;EP管;渦旋儀;水浴鍋等。實驗步驟1.從新鮮樣品中提取總蛋白
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實驗試劑細胞培養液成分為RPMI1640基本培養液10%胎牛血清1%三抗,PBS,凍存培養液(含10%DMSO或甘油),Trypsine-EDTA消化液,液氮實驗設備水浴鍋,35mm培養皿,37℃培養箱,無菌凍存管,低溫冰箱,超低溫冰箱實驗材料已凍存的HEK293和HeLa細胞實驗步驟1.細胞的復蘇1)保存細胞的冷凍管直接投入37℃溫水,不時搖動令其盡快融化,解凍1分鐘;2)取出冷凍管,用酒精消毒后打開管蓋,吸出細胞懸液,注入離心管并滴加10倍以上培養液,混合后低速離心,除去上清液,再用培養液重
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1、冷凍管應如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內全部融化,并注意水面不可超過冷凍管蓋沿,否則易發生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預防冷凍管之爆裂。2、細胞冷凍管解凍培養時,是否應馬上去除DMSO?除少數特別注明對DMSO敏感之細胞外,絕大部分細胞株(包括懸浮性細胞),在解凍之后,應直接放入含有10-15ml新鮮培養基之培養角瓶中,待隔天再置換新鮮培養基以去除DMSO即可,如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附之問題。3、可否使

