布氏桿菌病是一種由布魯氏菌引起的人獸共患動物源性細菌性傳染病，除了通過血培養、膿汁培養查菌，也可以通過采集血液來進行檢測?，F階段布病的檢測方法較多：如虎紅平板凝集試驗（RBPT）、試管凝集試驗（SAT）、補體結合試驗（CFT）、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）等。

由于布氏桿菌生長緩慢，一般生長時間>3天，所以想要快速篩查一下是否得布病，虎紅凝集試驗是一個非常好的選擇，既方便又快速。

所需設備和試劑：虎紅試劑，患者血清，一小塊紙板或者玻璃板都行（我們醫院使用的是免疫做TRUST的類似紙板）

試劑：抗原是酸性(PH3.6-3.7)帶色的抗原（可以理解為滅活的布魯菌菌體），該抗原與被檢血清作用時能抑制血清中的lgM類抗體的凝集活性、檢查的抗體是lgG類，因此提高了反應的特異性。

操作方法

推薦使用廣州華南生物工程有限公司布魯氏菌檢測試劑（虎紅平板）

1、實驗前，應將試劑在室溫放置30min。

2、將各方格標記被檢血清號，然后加相應被檢血清30μL（0.03mL）。

3、在被檢血清旁滴加虎紅平板凝集抗原30μL（0.03mL）。試劑在使用前必須搖勻。想像一下，里面都是滅活的布魯菌菌體，如果不搖一下，肯定都沉在下面了。

4、直接用槍頭攪動血清和抗原，使之充分混合，在4分鐘內觀察結果。

5、每次試驗應設陰性血清、陽性血清對照。

結果判讀

1、在陰、陽性血清對照成立的條件下，方可對被檢血清進行判定。

2、受檢血清在4min內出現肉眼可見凝集現象者判為陽性(+)，無凝集現象，呈均勻粉紅色者判為陰性(-)。一定注意超過4min沒有判定意義。

3、在觀察時可將凝集板進行搖動使混合液流動，更利于結果的觀察。

這五個樣本中，12，19號對應的為陽性，其余3個為陰性。

注意事項（個人感悟）

1、這個試驗本質上還是抗原抗體反應，所以脂血等是否有影響，我覺得會有，但是影響多大，目前我還沒有查到相關資料，我覺得可以參考TRUST試驗。我們做過一個黃疸的血，加完試劑后，就由這個玫粉色變成了橘紅色。

2、本試驗溫度在室溫22±4℃進行結果更加準確。

3、凡是試驗中凝集顆粒不規則，大小不勻，片狀或絮狀，凝集不清澈者，一般為假陽性，反之凝集顆粒規則大小均勻，凝集清澈者為陽性。【我們醫院這個試驗也是剛開，假陽性目前還沒有遇到過，有相關圖片的同學，可以給我們提供，讓更多的同行看到。另外我們目前還沒有在顯微鏡下看過，對于假陽性是否在顯微鏡下觀察能更好一些，我們也沒有相關經驗，如果有同行有這方面的經驗，希望能給大家一起分享】

4、抗原的質量是影響布病血清學試驗結果準確性的關鍵性因素之一，一定要采購正規廠家、產品穩定、經國家認可的產品。運輸過程中要2-8℃冷鏈運輸，以確保產品質量。

以上也是我們個人的一些看法，如果有什么錯誤的地方，請大家批評指正。

關于血培養中查布氏桿菌，以前陳東科老師推薦的柯氏染色法，效果真的很好，不需要特殊的一起，可以推廣。后期陳老師又給我們指導過一次，可以第一液可以滴完后，再在火焰上直接加熱一分鐘。