布氏桿菌病是一種由布魯氏菌引起的人獸共患動(dòng)物源性細(xì)菌性傳染病，除了通過(guò)血培養(yǎng)、膿汁培養(yǎng)查菌，也可以通過(guò)采集血液來(lái)進(jìn)行檢測(cè)。現(xiàn)階段布病的檢測(cè)方法較多：如虎紅平板凝集試驗(yàn)（RBPT）、試管凝集試驗(yàn)（SAT）、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)（CFT）、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）等。

由于布氏桿菌生長(zhǎng)緩慢，一般生長(zhǎng)時(shí)間>3天，所以想要快速篩查一下是否得布病，虎紅凝集試驗(yàn)是一個(gè)非常好的選擇，既方便又快速。

所需設(shè)備和試劑：虎紅試劑，患者血清，一小塊紙板或者玻璃板都行（我們醫(yī)院使用的是免疫做TRUST的類(lèi)似紙板）

試劑：抗原是酸性(PH3.6-3.7)帶色的抗原（可以理解為滅活的布魯菌菌體），該抗原與被檢血清作用時(shí)能抑制血清中的lgM類(lèi)抗體的凝集活性、檢查的抗體是lgG類(lèi)，因此提高了反應(yīng)的特異性。

操作方法

推薦使用廣州華南生物工程有限公司布魯氏菌檢測(cè)試劑（虎紅平板）

1、實(shí)驗(yàn)前，應(yīng)將試劑在室溫放置30min。

2、將各方格標(biāo)記被檢血清號(hào)，然后加相應(yīng)被檢血清30μL（0.03mL）。

3、在被檢血清旁滴加虎紅平板凝集抗原30μL（0.03mL）。試劑在使用前必須搖勻。想像一下，里面都是滅活的布魯菌菌體，如果不搖一下，肯定都沉在下面了。

4、直接用槍頭攪動(dòng)血清和抗原，使之充分混合，在4分鐘內(nèi)觀察結(jié)果。

5、每次試驗(yàn)應(yīng)設(shè)陰性血清、陽(yáng)性血清對(duì)照。

結(jié)果判讀

1、在陰、陽(yáng)性血清對(duì)照成立的條件下，方可對(duì)被檢血清進(jìn)行判定。

2、受檢血清在4min內(nèi)出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)凝集現(xiàn)象者判為陽(yáng)性(+)，無(wú)凝集現(xiàn)象，呈均勻粉紅色者判為陰性(-)。一定注意超過(guò)4min沒(méi)有判定意義。

3、在觀察時(shí)可將凝集板進(jìn)行搖動(dòng)使混合液流動(dòng)，更利于結(jié)果的觀察。

這五個(gè)樣本中，12，19號(hào)對(duì)應(yīng)的為陽(yáng)性，其余3個(gè)為陰性。

注意事項(xiàng)（個(gè)人感悟）

1、這個(gè)試驗(yàn)本質(zhì)上還是抗原抗體反應(yīng)，所以脂血等是否有影響，我覺(jué)得會(huì)有，但是影響多大，目前我還沒(méi)有查到相關(guān)資料，我覺(jué)得可以參考TRUST試驗(yàn)。我們做過(guò)一個(gè)黃疸的血，加完試劑后，就由這個(gè)玫粉色變成了橘紅色。

2、本試驗(yàn)溫度在室溫22±4℃進(jìn)行結(jié)果更加準(zhǔn)確。

3、凡是試驗(yàn)中凝集顆粒不規(guī)則，大小不勻，片狀或絮狀，凝集不清澈者，一般為假陽(yáng)性，反之凝集顆粒規(guī)則大小均勻，凝集清澈者為陽(yáng)性。【我們醫(yī)院這個(gè)試驗(yàn)也是剛開(kāi)，假陽(yáng)性目前還沒(méi)有遇到過(guò)，有相關(guān)圖片的同學(xué)，可以給我們提供，讓更多的同行看到。另外我們目前還沒(méi)有在顯微鏡下看過(guò)，對(duì)于假陽(yáng)性是否在顯微鏡下觀察能更好一些，我們也沒(méi)有相關(guān)經(jīng)驗(yàn)，如果有同行有這方面的經(jīng)驗(yàn)，希望能給大家一起分享】

4、抗原的質(zhì)量是影響布病血清學(xué)試驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性的關(guān)鍵性因素之一，一定要采購(gòu)正規(guī)廠家、產(chǎn)品穩(wěn)定、經(jīng)國(guó)家認(rèn)可的產(chǎn)品。運(yùn)輸過(guò)程中要2-8℃冷鏈運(yùn)輸，以確保產(chǎn)品質(zhì)量。

以上也是我們個(gè)人的一些看法，如果有什么錯(cuò)誤的地方，請(qǐng)大家批評(píng)指正。

關(guān)于血培養(yǎng)中查布氏桿菌，以前陳東科老師推薦的柯氏染色法，效果真的很好，不需要特殊的一起，可以推廣。后期陳老師又給我們指導(dǎo)過(guò)一次，可以第一液可以滴完后，再在火焰上直接加熱一分鐘。