ATCC 質控菌株技術專欄 · 微生物檢測與標準化參考

一產品概述

二技術參數

下表匯總 產氣莢膜梭菌 的核心技術參數，便于在方法確認與注冊資料中直接引用。

三生物學特性

ATCC 13124為革蘭陽性粗大桿菌（0.6-2.4 × 3-9 μm），在厭氧條件下培養18-24小時后，菌體呈短鏈或單個排列。在TSC（亞硫酸鹽-環絲氨酸）瓊脂上，菌落黑色（因亞硫酸鹽還原產生硫化鐵沉淀），邊緣整齊，直徑2-4mm。
該菌的關鍵生化特征：卵磷脂酶（α毒素/磷脂酶C）陽性——在含卵黃的培養基上形成不透明沉淀環；硝酸鹽還原陽性；明膠液化陽性；運動性陰性（這是產氣莢膜梭菌區別于其他梭菌的重要特征）。
芽孢為橢圓形，位于菌體中央或偏端。芽孢形成需要較嚴格的條件（堿性pH、低營養），在常規培養基上芽孢形成率較低。芽孢耐熱性中等（D???值約15-20分鐘），這一特性使其能在烹飪后存

四培養條件與操作要點

### 厭氧培養技術
產氣莢膜梭菌是嚴格厭氧菌，必須在無氧環境中培養。常用的厭氧培養方法：
厭氧罐法（推薦）： 將培養皿放入厭氧罐中，使用商業化厭氧產氣包（如AnaeroGen、GasPak）產生無氧環境。產氣包在密封后可在2-3小時內將罐內O?濃度降至<1%。筆者建議每次使用厭氧罐時放入厭氧指示條（含美藍或刃天青），確認厭氧環境建立成功。
厭氧工作站： 適用于大批量厭氧培養，操作更方便。工作站內充入N?/H?/CO?混合氣體（85:10:5），通過鈀催化劑去除殘余O?。
流體培養基法： 流體巰基乙酸鹽培養基（FTM）含有還原劑（巰基乙酸鈉），可在培養基底部形成厭氧區，適用于增菌培養。
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五常見問題

1. Q1：厭 厭氧產氣包的活化需要一定時間（通常2-3小時）。如果指示條在3小時后仍未充分變色，檢查厭氧罐的密封圈是否完好、產氣包是否過期。也可考慮增加產氣包數量（大罐建議用2-3個）。筆者曾遇到因厭氧罐蓋子未擰緊導致漏氣的情況，重新密封后問題解決。

2. Q2：T TSC瓊脂上的黑色菌落是產氣莢膜梭菌的特征性表現（亞硫酸鹽還原）。非黑色菌落通常是其他厭氧菌或兼性厭氧菌，不具有亞硫酸鹽還原能力。但需注意：某些梭菌種（如腐敗梭菌）也可在TSC上形成黑色菌落，因此初篩陽性菌落仍需做生化確認（卵磷脂酶、運動性等）。

3. Q3：如 兩者均可引起食物中毒，但機制不同。產氣莢膜梭菌：潛伏期8-16小時，水樣腹瀉為主，毒素在腸道內產生。蠟樣芽孢桿菌：腹瀉型潛伏期8-16小時（類似），嘔吐型潛伏期1-6小時。區分的關鍵在于食品中檢出的優勢菌種和腸毒素檢測結果。 關于杭州康氧醫療器械有限公司 杭州康氧醫療器械有限公司專注于微生物標準菌株

六采購指引

七免責聲明