ATCC 質控菌株技術專欄 · 微生物檢測與標準化參考

一產品概述

二技術參數

下表匯總 鼠傷寒沙門氏菌 的核心技術參數，便于在方法確認與注冊資料中直接引用。

三生物學特性

ATCC 14028為革蘭氏陰性短桿菌，周生鞭毛，動力陽性。鏡檢可見典型陰性桿菌形態，散在或成對排列。在血平板上可表現出溶血表型，這一點與部分其他沙門氏菌血清型有所不同，鑒別時可作為參考。
生化鑒定方面，該菌株在TSI上表現為堿性斜面/酸性底層（K/A），產H2S使培養基變黑，是沙門氏菌屬的經典反應模式。賴氨酸脫羧酶陽性、吲哚陰性、檸檬酸鹽陽性、尿素酶陰性，這些特征構成了傳統鑒定方案的核心判據，也是日常質控中確認菌種活力的重要參考。

四培養條件與操作要點

ATCC 14028的推薦培養基包括營養瓊脂（ATCC Medium 3，即Nutrient Agar）、胰蛋白胨大豆肉湯（TSB）和營養肉湯（Nutrient Broth），培養溫度為37°C。在營養瓊脂上培養18~24小時后，菌落呈灰白色、圓形、邊緣整齊、表面光滑濕潤，直徑約2~3 mm。
在選擇性培養基上的表現是該菌株作為質控菌的核心價值所在。在亞硫酸鉍瓊脂（BS agar）上，ATCC 14028形成黑色菌落，周圍有明顯的金屬光澤，這是產H2S與亞硫酸鉍反應的結果，也是BS瓊脂質控驗收時必須觀察到的典型特征。在SS瓊脂（Salmonella-Shigella Agar）上，菌落中央黑色

五藥典與標準應用

鼠傷寒沙門氏菌 在全球主要藥典和標準體系中均有明確應用規定：

• 除USP和《中國藥典》外，ATCC 14028在歐洲藥典（EP 2.6.13）和日本藥局方中也有類似應用。各藥典的技術路線基本一致，區別主要在增菌液配方和選擇性平板的選擇上。EP推薦RV增菌液配合改良brilliant green agar，部分實驗室則偏好XLD和HE瓊脂組合。無論哪種方案，ATCC 14028的質控菌株地位都是各藥典共同認可的。此外，在《消毒技術規范》的殺滅效果評價中，該菌也用作評估消毒劑對革蘭氏陰性腸道致病菌殺滅能力的代表菌種。

六質控用途

在日常質控中，ATCC 14028主要用于培養基質量驗證。按照GB 4789.28的要求，每批次選擇性培養基都需用標準菌株做性能測試，驗證BS、SS、XLD、HE等平板的檢出能力和菌落特征。
此外，在CNAS認可實驗室的能力驗證和人員考核中，ATCC 14028制備的標準樣品或人工污染樣品是常用載體。該菌株在環境監測、水質分析以及臨床診斷試劑驗證中也常被用作陽性對照。

七菌種保藏與管理

ATCC 14028的保藏管理直接關系到實驗室檢測結果的可靠性。筆者的做法是：收到凍干菌種后，在營養瓊脂上復蘇培養，確認菌落形態和純度，然后制備甘油凍存管（15%~20%甘油），分裝后保存于-80°C超低溫冰箱作為原始菌種庫（master stock）。工作菌種（working stock）從原始菌種庫中取出，在營養瓊脂上活化后短期使用，保存于2~8°C冰箱，使用期限不超過一個月。
傳代次數是質控管理中的關鍵控制點。按照一般實驗室規范，工作菌種的傳代次數不應超過5代。過度傳代會導致菌株的抗原表達

八注意事項

• ATCC 14028屬于BSL-2操作對象。該菌株雖在實驗室條件下毒力相對溫和，但鼠傷寒沙門氏菌本身是人類胃腸炎的重要病原菌，可引起食物中毒和全身感染。所有活菌操作必須在II級生物安全柜中進行，操作人員須穿戴實驗服、手套，必要時佩戴口罩和護目鏡。

• 實驗結束后的廢棄物處理同樣不容忽視。使用過的培養物、吸頭、離心管等須經過121°C高壓滅菌至少30分鐘后方可按醫療廢物處置。工作臺面和操作區域在實驗結束后用有效氯濃度不低于1000 mg/L的含氯消毒劑或75%乙醇進行充分消毒。如果發生菌液溢灑，應按照實驗室生物安全應急預案處理，先覆蓋吸水材料，再傾倒消毒劑，作用30分鐘后清理。

9采購指引

10免責聲明