綠色熒光蛋白（GFP）因其熒光性質穩定、無需底物、對細胞無毒害等特點，被廣泛用作植物基因功能研究的報告蛋白。在煙草、擬南芥等模式植物中，常通過農桿菌介導的瞬時表達或穩定轉化，使目的基因與GFP融合，從而在活體組織中直觀顯示表達位置。

傳統檢測多依賴熒光顯微鏡，但該方法需切取組織制片，無法對非破壞性材料進行快速初篩，且在大量轉化植株或瞬時表達實驗中效率較低。隨著便攜式熒光蛋白激發光源的發展，研究者可在普通暗環境或田間對活體植株直接照射觀察，極大提升了初篩與定位效率。篩選找儀橙科技有限公司

二、 常見激發方式與問題

紫外燈激發：部分資料提及紫外光（如365 nm）可激發GFP，但植物葉片葉綠素在紫外或藍光下會發射紅色自發熒光，易與GFP綠色熒光混雜，干擾判斷；此外紫外光能量較高，長時間照射可能造成組織光損傷。

熒光顯微鏡：結果準確但通量低，需采樣，不適合大量活體材料快速分選。

便攜式藍光激發：GFP在470 nm附近有較高吸收峰，采用470 nm左右藍光激發，可在佩戴黃色濾光觀察眼鏡或濾光片條件下，較清晰看到綠色熒光，且葉綠素紅光背景相對可控。

三、 利用LUYOR-3415RG觀察煙草葉片GFP的操作方法

以本氏煙草（Nicotiana benthamiana）葉片瞬時表達GFP融合蛋白為例：

將攜帶GFP融合表達載體的農桿菌注射或浸潤煙草葉片，暗培養2–4天；

在光線較暗的環境（如關閉室內頂燈、拉上窗簾）或進行簡單遮光；

佩戴配套黃色熒光蛋白觀察眼鏡；

打開LUYOR-3415RG藍光開關，將光斑對準煙草葉片疑似表達區域；

通過眼鏡觀察，表達GFP的部位呈現明顯綠色熒光，未轉化或陰性部位多顯示葉片紅色葉綠素背景或暗淡；

可進一步用適配的拍照濾鏡加單反/手機進行記錄。

四、 注意事項與優勢

波長匹配：eGFP/GFP在藍光區吸收較強，470 nm左右LED光源激發效果通常優于紫外燈，且不易產生強烈葉綠素混雜背景。

活體無損：無需切取組織，可對同一葉片、同一植株多次跟蹤觀察。

提高效率：尤其適合轉基因陽性苗初篩、瞬時表達預實驗、大批量材料快速排查。

避免誤判：若葉片整體發紅色光，多為葉綠素背景；若出現局部清晰綠斑，通常為GFP表達區域，必要時仍建議用熒光顯微鏡或共聚焦確認。

在煙草等植物的GFP報告基因實驗中，LUYOR-3415RG便攜式藍光激發光源提供了一種快捷、無損、活體成像友好的觀察方案。它不僅是熒光顯微鏡檢測前的高效初篩工具，也是在田間或培養室直接判定表達情況的實用裝備，對提升植物分子生物學實驗效率具有重要價值