當前位置:上海儀橙科技有限公司>>技術文章>>光激發光源在作物轉基因陽性苗高通量篩選
在現代種業研發中,通過農桿菌介導法將抗蟲、抗病或高品質性狀基因導入受體作物(如煙草、玉米、大豆等)已成為常態。為了快速區分轉化植株與非轉化植株,研發人員常在T0代引入綠色熒光蛋白(GFP)作為可視化篩選標記。
然而,傳統的轉基因陽性苗篩選主要依賴PCR分子檢測,不僅需要剪葉、提取DNA,還需經歷漫長的擴增與電泳分析,周期長且耗材成本高。熒光顯微鏡雖直觀,但無法對大量幼苗進行快速普查。因此,開發一種能夠快速、無損、在現場進行的篩選工具,是當前育種企業的迫切需求。
二、 技術方案與操作流程
針對作物育種場景,采用LUYOR-3415RG便攜式藍光激發光源配合專用濾光眼鏡的方案,可實現從實驗室到溫室再到大田的無縫切換。
1. 材料準備
待檢測的T0代轉化植株(以煙草為例),生長至2-4葉期即可進行篩查。
2. 現場篩查
無需將植株移入實驗室,直接在溫室或大田環境下:
佩戴黃色熒光觀察眼鏡;
使用LUYOR-3415RG發射470 nm藍光,距離葉片20-30 cm進行照射;
在暗背景下觀察葉片或根系,表達GFP的部位呈現明亮綠色熒光,陰性對照則顯示暗紅色或暗紫色背景。
3. 數據記錄
利用手機配合黃色濾光片,對陽性苗進行活體成像存檔,建立數字化篩選檔案。
三、 應用優勢與效益分析
大幅提升篩選通量:相比PCR法(每人每天最多處理200-300株),利用便攜式激發光源每人每小時可篩查上千株幼苗,極大縮短了育種周期。
降低綜合成本:省去了DNA提取試劑、離心管、電泳耗材等費用,且避免了因剪葉造成的植株損傷,提高了移栽成活率。
無損且精準:無需破壞植株組織結構,實現了真正的非破壞性篩選。470 nm藍光激發有效避開了葉綠素自發熒光的干擾,特異性強,假陽性率低。
操作標準化:設備輕便(僅重幾百克),即開即用,不受場地限制,便于育種基地的規模化推廣使用。
四、 結論
在作物遺傳轉化與分子標記輔助育種流程中,引入LUYOR-3415RG便攜式藍光激發光源,將傳統的“實驗室破壞性檢測"轉變為“田間活體快速篩查",不僅解決了轉基因陽性苗篩選的通量瓶頸,更為種業企業節省了寶貴的時間和研發經費,是推動育種工作標準化的有力工具。
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