當前位置:上海儀橙科技有限公司>>技術文章>>用藍光燈篩選擬南芥的GFP標簽
在植物分子生物學研究中,綠色熒光蛋白(GFP)常被用作報告基因,用于直觀判斷擬南芥等模式植物中目標基因的表達情況或轉基因植株的陽性鑒定。GFP源自維多利亞多管水母,在藍光或紫外光激發下可發出綠色熒光,具有無需底物、可活體觀察、對細胞無顯著毒性等優點,因而在轉基因植株初篩、亞細胞定位及蛋白互作等實驗中應用廣泛。
傳統觀察方式多依賴熒光顯微鏡,但在擬南芥轉基因陽性苗的大批量初篩、活體組織快速判定或溫室/田間現場觀測時,制樣和逐個上鏡往往效率有限,且樣本在制備過程中可能存在損傷風險。
針對GFP的激發需求,可采用中心波長約450 nm左右的藍光波段激發光源(如LUYOR-3415系列中選配的R波段),配合相應濾波眼鏡或濾光附件,對擬南芥葉片、根系、幼苗或種子進行直接照射,從而在普通光照環境下快速識別綠色熒光信號。該方法為非接觸式觀察,樣本經照射后仍可繼續培養或用于后續分析,適合作為高通量初篩與快速驗證手段。
綜上,GFP作為成熟的活體報告探針,其高效觀察不僅依賴于探針本身的光譜特性,也與激發光源波長匹配、觀察濾光方式及實驗場景選擇密切相關。
擬南芥被用于科學研究,還得從德國植物學家Friedrich Laibach說起。1905年,Laibach正在攻讀博士學位,他的研究課題是觀察和分析植物的染色體數目。于是,Laibach就從實驗室所在地波恩(Bonn),以及他的家鄉林堡(Limburg)收集了一些植物樣本進行研究,其中就包括擬南芥。可能由于擬南芥真的是太不起眼了,當時的植物分類學家還沒對它們進行系統的研究和分類,于是Laibach就自創了一種方法,以采集地對其命名。由于當時的擬南芥樣品是從他的家鄉林堡(Limburg)采集的,因此種被用于科學研究的擬南芥生態型就被命名為Limburg。
Laibach發現,擬南芥只有5對染色體,是當時已知的染色體數目最少的一種植物。他的研究成果于1907年發表,可是當時并沒有引起人們的關注。不過,從此以后,Laibach卻對這種名不見經傳的小草產生了濃厚的興趣。博士畢業后,Laibach在法蘭克福大學找到了職位。在1930年到1950年之間,Laibach和他的同事從世界各地收集了150多種擬南芥生態型,并將種子仔細分類和妥善保存。這些收集來的種子奠定了后來AIS(Arabidopsis Information Service)種子庫的基礎,并在此基礎上發展出了鼎鼎大名的擬南芥種質資源庫ABRC(Arabidopsis Biological Resource Center)。


擬南芥的RFP標記表達
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