大豆作為全球重要的油料與經濟作物，其轉基因育種與基因功能研究一直是農業科技領域的焦點。在大豆遺傳轉化體系中，綠色熒光蛋白（GFP/eGFP）因其直觀、靈敏且無放射性的特點，常被用作報告基因以指示外源基因的轉化狀態。然而，大豆子葉肥大、葉綠素含量高，傳統的GFP檢測往往需要借助熒光顯微鏡對切片或提取液進行檢測，操作繁瑣且具有破壞性。

針對這一痛點，上海路陽推出了LUYOR-3415RG便攜式雙波長熒光蛋白激發光源。該設備能夠輸出高強度的440–470 nm藍光，高效激發大豆組織中的GFP發出明亮的綠色熒光。配合專用黃色濾光眼鏡（LUV-50A），研究人員可在溫室或大田環境下，對大豆再生苗及愈傷組織進行無損、實時、高通量的陽性株篩選，極大地簡化了大豆轉基因育種的初篩流程。

一、實驗材料

• 待測材料：含GFP報告基因的轉基因大豆T?代再生苗（子葉期至V2期）或T?代萌發種子。

  
  

• 陰性對照：未轉化的受體大豆品種（如Williams 82、中黃13等）。

  
  

• 儀器與耗材：

  
  

• LUYOR-3415RG 雙波長熒光蛋白激發光源

  
  

• 配套黃色熒光觀察眼鏡 LUV-50A

  
  

• 暗室或遮光環境（溫室角落、紙箱均可）

  
  

二、篩選操作流程

1. 樣品準備

將大豆轉基因再生苗或萌發的T?代種子置于光照培養箱或溫室中。大豆GFP表達通常在下胚軸（Hypocotyl）和根部最為明顯，因此重點觀察這兩個部位。

2. 熒光激發與觀察

1. 環境布置：關閉室內主光源，營造弱光環境。

   
   

2. 佩戴裝備：操作人員佩戴LUV-50A黃色濾光眼鏡。

   
   

3. 照射觀察：

   
   

• ? 陽性株：下胚軸皮層或根尖呈現亮綠色熒光，與周圍暗色背景形成強烈反差。（可以找后臺工作人員判斷）

  
  

• ? 陰性株：僅顯示暗色或深褐色的葉綠素背景，無綠色光斑。

  
  

• 開啟LUYOR-3415RG的藍光通道。

  
  

• 將光斑對準大豆幼苗的下胚軸或根尖部位，距離保持在15–25 cm。

  
  

• 通過濾光眼鏡觀察：

  
  

3. 結果記錄

利用智能手機加裝黃色濾光片，拍攝記錄陽性植株。建議對陽性苗進行掛牌標記，隨后轉入正常的抗性篩選（如草甘膦/草銨膦）或分子鑒定流程。

三、大豆篩選的特殊注意事項

1. 避開子葉干擾：大豆子葉富含葉綠素，自發熒光強，容易掩蓋GFP信號。建議重點觀察下胚軸和根部，此處GFP信噪比最高。

   
   

2. 愈傷組織篩選：對于正在進行遺傳轉化的大豆愈傷組織，可在體視鏡下直接用3415RG照射，快速剔除未轉化或空載體愈傷，減少后期工作量。

   
   

3. 光照控制：由于大豆葉片較大，建議在傍晚或全黑環境下觀察，以獲得最佳對比度。

   
   

四、小結

LUYOR-3415RG熒光蛋白激發光源為大豆轉基因研究提供了一種高效的可視化工具。它不僅解決了大豆因組織致密導致的GFP觀察難問題，更實現了從“實驗室顯微觀察"到“田間手持篩選"的跨越，是大豆生物技術與分子育種實驗室的理想標配儀器。

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